太子參多糖及姜黃素激活Nrf2緩解胰島素抑制作用機制研究.pdf

1、目的:檢測太子參多糖（pseudostellaria heterophylla polysaccharide，PHP）減輕鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)糖尿病小鼠降血糖作用以及姜黃素(Curcumin,Cur)對百草枯(paraquat，PQ)誘導(dǎo)的胰島素抵抗(Insulin Resistance，IR)模型Nrf2抗氧化系統(tǒng)作用，探討中藥治療糖尿病及緩解胰島素抵抗的藥物作用機制。
　　方法:
　　本

2、研究第一部分通過給C57BL/6J小鼠腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)糖尿病模型。測定小鼠隨機血糖，大于16.7mmol，判定模型成功。小鼠隨機分成3組，分別為:對照組、STZ模型組、STZ+PHP干預(yù)組（PHP組）。造模后，根據(jù)本實驗室預(yù)實驗結(jié)果給予PHP組小鼠含PHP（500 mg/Kg）的高脂飼料干預(yù)，連續(xù)干預(yù)7天。測定小鼠葡萄糖耐量，結(jié)果顯示有療效后，取材。留取小鼠血清樣品，迅速取小鼠胰島素敏感組織

3、肝臟、肌肉。而后采用TAB結(jié)合法測定小鼠血清MDA，蛋白免疫印跡方法(western blot，WB)檢測肝臟、肌肉組織PKBSer473、P-AMPK、Nrf2、NQO-1、IκBα等蛋白水平和磷酸化變化。
　　第二部分進(jìn)行姜黃素治療百草枯氧化應(yīng)激誘導(dǎo)C57BL/6J小鼠胰島素抵抗的實驗。小鼠隨機分成3組，分別為:對照組、PQ模型組、PQ+Cur干預(yù)組（Cur組）。葡萄糖耐量實驗檢測小鼠胰島素抵抗模型成功，Cur組小鼠進(jìn)行姜黃素

4、灌胃治療7d，再次進(jìn)行葡萄糖耐量實驗，顯示有療效，取材。留取血清樣品，迅速取小鼠胰島素敏感組織肌肉。提取出細(xì)胞核、線粒體，然后用TAB結(jié)合法測定小鼠肌肉組織及線粒體MDA。蛋白免疫印跡方法(western blot，WB)檢測肌肉組織蛋白水平和磷酸化變化。
　　結(jié)果:鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）誘導(dǎo)的C57BL/6J小鼠糖尿病模型，小鼠Nrf2抗氧化系統(tǒng)和葡萄糖耐量均明顯受損。太子參多糖能明顯降低小鼠血清MD

5、A水平。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，太子參多糖可明顯激活小鼠AMPK及PKBSer473信號傳導(dǎo)，增強炎癥抑制蛋白IκBα的表達(dá)。胰島素敏感組織肝臟Nrf2系統(tǒng)被激活，但肌肉組織，太子參多糖激活Nrf2系統(tǒng)作用不明顯。
　　PQ氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的胰島素抵抗模型，小鼠Nrf2抗氧化系統(tǒng)和葡萄糖耐量均明顯受損。姜黃素可明顯激活小鼠Nrf2系統(tǒng)，促進(jìn)Nrf2核轉(zhuǎn)位和NQO-1表達(dá)，小鼠血清MDA水平的降低與此相符，炎癥抑制蛋白IκBα的表達(dá)也增強。姜黃

6、素緩解氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，并對抗PQ氧化應(yīng)激所致PKBSer473的損害。
　　結(jié)論:太子參多糖能夠有效抑制STZ誘導(dǎo)的C57BL/6J小鼠高血糖作用，其機制可能與改善胰島素信號傳導(dǎo)，減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)，激活Nrf2信號通路及抑制炎性信號激活作用有關(guān)。同樣，姜黃素治療可激活PQ誘導(dǎo)的胰島素抵抗小鼠Nrf2抗氧化系統(tǒng)，改善胰島素信號傳導(dǎo)，減輕氧化應(yīng)激和炎癥水平。
　　本研究表明，太子參多糖和姜黃素緩解胰島素抵抗作用與其增強內(nèi)源性