阿魏酸鈉對(duì)多囊卵巢大鼠顆粒細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的： 通過(guò)采用雄激素造模法皮下注射脫氫表雄酮建立多囊卵巢大鼠(PCO大鼠)模型，然后以PCO大鼠為研究對(duì)象，研究阿魏酸鈉對(duì)PCO大鼠體重增幅、血清激素水平、卵巢顆粒細(xì)胞凋亡情況及卵巢顆粒細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bc1-2和Bax表達(dá)的影響，探討阿魏酸鈉對(duì)PCO大鼠卵巢顆粒細(xì)胞的抗凋亡作用機(jī)制及對(duì)多囊卵巢大鼠的治療效果。 方法： 40只23日齡SD清潔級(jí)雌性大鼠隨機(jī)分成模型組和空白組，模型組采用雄激素造模法，每天皮下注射

2、脫氫表雄酮6mg/100g體重+0.2ml注射用油劑，連續(xù)20天，建立多囊卵巢大鼠模型。造模完成后模型組隨機(jī)抽取10只，通過(guò)血清激素水平和卵巢組織學(xué)多囊變來(lái)評(píng)價(jià)造模效果，造模成功率>80％時(shí)，將模型組剩余大鼠隨機(jī)分成阿魏酸鈉治療組和對(duì)照組，各10只。阿魏酸鈉治療組每天給予阿魏酸鈉200mg/kg腹腔注射，對(duì)照組和空白組則給予0.5ml生理鹽水腹腔注射，連續(xù)4周。阿魏酸鈉干預(yù)期間每天觀察各組動(dòng)物的體重變化情況；阿魏酸鈉干預(yù)完成后腹主動(dòng)脈采

3、血放免法測(cè)血清激素水平的變化情況；摘取各組大鼠雙側(cè)卵巢，在解剖顯微鏡下去除卵巢組織表面脂肪，10％甲醛固定，石蠟包埋常規(guī)切片，HE染色鏡檢，TUNEL法觀察各組卵巢顆粒細(xì)胞凋亡情況的差異，免疫組化法觀察卵巢顆粒細(xì)胞Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)水平的變化。 結(jié)果： ①動(dòng)物體重變化：阿魏酸鈉治療組體重(75.010±6.985g)與對(duì)照組(90.467±9.035g)、空白組(60.300±9.056g)比較，治療組動(dòng)物體重增

4、加幅度明顯降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P<0.001)；②血清激素水平改變：血清T濃度阿魏酸鈉治療組(8.631±4.718ng/ml)與對(duì)照組(16.181±5.314ng/ml)、空白組(7.571±4.326ng/ml)比較顯著性降低(P<0.001)；血清E2濃度阿魏酸鈉治療組(11.685±6.158pg/ml)與對(duì)照組(15.551±7.632pg/ml)比較明顯降低(P<0.05)；血清P濃度阿魏酸鈉治療組(134.463±

5、10.668ng/ml)與對(duì)照組(29.125±9.147ng/ml)比較明顯升高(P<0.05)，血清FSH濃度阿魏酸鈉治療組與對(duì)照組比較略升高，無(wú)明顯差異；血清LH濃度阿魏酸鈉治療組與對(duì)照組比較略降低，無(wú)明顯差異；③組織學(xué)檢查：肉眼觀察：阿魏酸鈉治療組和對(duì)照組卵巢體積增大，色稍白，表面光滑未見(jiàn)明顯囊狀擴(kuò)張．光鏡HE染色觀察：對(duì)照組卵巢鏡下可見(jiàn)多個(gè)囊狀擴(kuò)張的卵泡及閉鎖卵泡，體腔明顯增大，占據(jù)整個(gè)卵巢髓質(zhì)，顆粒細(xì)胞層明顯減少至2-3層，

6、卵泡內(nèi)卵母細(xì)胞或放射冠消失，卵泡膜層增厚，未見(jiàn)黃體形成。阿魏酸鈉治療組卵巢鏡下可見(jiàn)多個(gè)囊狀擴(kuò)張的卵泡，但體腔較對(duì)照組明顯縮小，顆粒細(xì)胞層數(shù)增加至4-6層，并可見(jiàn)少量黃體形成；④TUNEL檢測(cè)：阿魏酸鈉治療組卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率(29.155±1.194％)較對(duì)照組(41.326±10.69％)顯著性降低(P<0.001)；⑤免疫組化結(jié)果：阿魏酸鈉治療組卵巢顆粒細(xì)胞Bcl-2表達(dá)的OD值較對(duì)照組顯著性地增高(P<0.001)，Bax表達(dá)的0

7、D值較對(duì)照組顯著性地降低(P<0.001)。 結(jié)論： 阿魏酸鈉能使多囊卵巢大鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白bcl-2表達(dá)明顯升高，Bax表達(dá)明顯降低，巢顆粒細(xì)胞凋亡率顯著性降低；使多囊卵巢大鼠的卵巢顆粒細(xì)胞層數(shù)增加，黃體形成增加：使PCO大鼠的體重、血清T、E2激素水平明顯下降；血清P激素水平明顯升高。因此，我們推測(cè)阿魏酸鈉改善多囊卵巢大鼠內(nèi)分泌狀況和降低體重增加幅度的作用可能與調(diào)節(jié)卵巢顆粒細(xì)胞上Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)，