Foxo1對小鼠顆粒細胞凋亡的影響.pdf

1、細胞凋亡是由體內(nèi)外因素觸發(fā)細胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而導(dǎo)致的細胞死亡過程，是多細胞生物維持自身穩(wěn)定的重要機制。卵泡閉鎖的本質(zhì)是顆粒細胞和卵母細胞的凋亡。轉(zhuǎn)錄因子Foxo1主要通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在動物的生長發(fā)育、代謝和細胞周期、凋亡等方面起重要作用。本實驗主要通過構(gòu)建FOXO1真核表達質(zhì)粒，在小鼠顆粒細胞中過表達FOXO1，從而研究Foxol對小鼠顆粒細胞凋亡的影響，探索卵泡閉鎖的分子機理。
　　 實驗結(jié)果表明：①正常情況下，小

2、鼠顆粒細胞表達Foxo1蛋白，F(xiàn)oxo1在顆粒細胞中的分布與其磷酸化狀態(tài)緊密相關(guān)，未磷酸化的Foxo1蛋白位于細胞核中，而磷酸化的Foxo1蛋白明顯出核，位于細胞質(zhì)中；②通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染成功實現(xiàn)了外源FOXO1基因在小鼠顆粒細胞內(nèi)的表達；③轉(zhuǎn)染36小時后，顆粒細胞形態(tài)發(fā)生變化，AnnexinV-PI細胞凋亡染色和Caspase-8活性測定說明FOXO1過表達促進顆粒細胞凋亡，并依賴于FOXO1與DNA的結(jié)合；④Real-time PCR結(jié)