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1、目的:初步探討糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的亮氨酸拉鏈蛋白(GILZ)在炎癥反應(yīng)過(guò)程中的作用機(jī)理。 方法:用無(wú)血清培養(yǎng)基分兩組培養(yǎng)人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞,其中一組加入地塞米松刺激,12小時(shí)后提取兩組細(xì)胞總RNA和總蛋白,運(yùn)用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法在轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)GILZ基因;運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting)方法在翻譯水平檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子NF-κB與AP-1的表達(dá)。收集10例臨床創(chuàng)傷患者傷后24小時(shí)內(nèi)的外周
2、血,提取白細(xì)胞后分兩組給予無(wú)血清培養(yǎng)基,并在其中一組加入地塞米松刺激,培養(yǎng)12小時(shí)后提取白細(xì)胞總RNA和總蛋白,運(yùn)用半定量RT-PCR方法在轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)GILZ基因;運(yùn)用Westernblotting方法在翻譯水平檢測(cè)NF-κB與AP-1的表達(dá)。 結(jié)果:在地塞米松刺激下,刺激組THP-1細(xì)胞和創(chuàng)傷患者外周血白細(xì)胞的GILZmRNA表達(dá)水平比對(duì)照組升高(P<0.01);刺激組的NF-κB與AP-1蛋白表達(dá)水平低于對(duì)照組(P<0.0
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