鋅指蛋白265在大鼠睪丸Sertoli細(xì)胞局部感染中的作用研究.pdf

1、Sertoli細(xì)胞(支持細(xì)胞)是睪丸主要的基質(zhì)細(xì)胞，參與血-睪屏障的組成，維持調(diào)控睪丸局部的免疫豁免[1,2]。鋅指蛋白265(Zinc finger protein265，ZNF265)是含兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)及具有絲氨酸/精氨酸富集區(qū)的鋅指蛋白[3]，目前研究主要認(rèn)為它具有RNA結(jié)合功能，和轉(zhuǎn)錄、前體mRNA剪切相關(guān)[4,5]。我們?cè)谇捌诘难芯恐邪l(fā)現(xiàn)，ZNF265在大鼠 Sertoli細(xì)胞中特異性高表達(dá)，且表達(dá)量和感染密切相關(guān)[6]；而Se

2、rtoli細(xì)胞可以通過改變IL-1、IL-6及TGF-β等的表達(dá)，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，增強(qiáng)睪丸局部抗感染的免疫應(yīng)答[7,8]。
　　本論文通過慢病毒介導(dǎo)的RNAi技術(shù)，沉默Sertoli細(xì)胞中ZNF265的表達(dá)，觀察Sertoli細(xì)胞在溶脲脲原體(Ureaplasma Urealyticum，UU)感染后，對(duì)IL-1α、IL-6、MCP-1、Toll樣受體（TLR2、TLR6）、TGF-β、FasL表達(dá)變化及對(duì)NF-κB信號(hào)通路激活

3、的影響；另外通過染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）技術(shù)進(jìn)一步從蛋白質(zhì)-DNA作用的角度探討ZNF265在Sertoli細(xì)胞中抗感染和免疫調(diào)節(jié)作用及可能的作用機(jī)制。
　　研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：慢病毒介導(dǎo)的RNAi技術(shù)有效的干擾了ZNF265在大鼠Sertoli細(xì)胞中的表達(dá)。在RNAi后，UU感染的早期，IL-1α、IL-6、MCP-1、TLR2和TLR6表達(dá)升高，NF-κB激活增加，TGF-β及FasL表達(dá)也升高；而在感染后期，IL-1α、IL-