Toll樣受體9在狼瘡腎炎患者外周血B淋巴細胞和腎組織中的表達及臨床意義.pdf

1、背景和目的： 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic Lupus：Erythematosus，SLE)是以自身反應性T、B細胞異?；罨a生致病性自身抗體和免疫復合物為主要特征的一種慢性炎癥性自身免疫病，可累及全身多系統(tǒng)、多器官，腎臟是最常見的受累器官之一。狼瘡腎炎(Impus Nephritis，LN)的發(fā)病機制迄今不明，其嚴重程度直接影響了SLE預后，約有10﹪～25﹪患者發(fā)展為終末期。腎衰，成為SLE死亡的重要原因之一。

2、 Toll樣受體(toll-like：receptors，TLRs)是天然免疫中重要的病原體識別受體，通過識別病原相關分子模式(pathogen associated molecular pattern，PAMP)誘導免疫效應分子表達，激活多種前炎性因子參與抗感染過程。新近研究發(fā)現(xiàn)，TLRs與其相應的特異性配體(包括內源和外源性配體)結合，促進細胞膜表面共刺激分子和MHC-Ⅱ類分子表達，增強APC抗原呈遞；此外，該過程中分泌大量Th1型

3、細胞因子如IFNs，IL-6，IL-12和FNF-α，直接調控CTL、B細胞等免疫細胞成熟和功能化，參與并調控特異性免疫應答過程，在天然免疫和特異性免疫之間架起橋梁。因此，TLRs與自身免疫性疾病的相關性日益受到關注。TLR家族成員TLR9因特異性識別細菌DNA和免疫復合物中非甲基化的CpG-DNA序列，啟動MyD88依賴型信號轉導途徑，通過級聯(lián)反應激活轉錄因子NF-кB、AP-1等，產生大量前炎癥因子及活化免疫細胞，參與和介導了B細胞

4、的活化、增殖及抗體產生，在自身免疫反應和炎癥過程中發(fā)揮重要作用，故有研究者推測CpG-DNA/TLR9信號途徑可能與SLE和LN發(fā)病機制密切相關。對TLR9的深入研究將進一步闡明狼瘡的發(fā)病機制，病情活動和器官損害的基礎，以及感染在發(fā)病過程中的潛在作用等，同時也為治療提供新的思路。本研究分別采用細胞內流式細胞技術和免疫組織化學方法檢測狼瘡腎炎患者外周血B淋巴細胞及腎組織TL,R9的表達情況，并分析其與疾病活動、臟器功能等臨床指標的關系，探

5、討TLR9在LN中潛在的作用機制及其臨床意義。 方法: (1)采用細胞內流式細胞術檢測39例確診的LN患者和18例健康人外周血CDl9<'+>B淋巴細胞上TLR9的表達情況，并將LN患者按SLE疾病活動指數(shù)．(SLEDAI)評分標準分為活動期組和非活動期組，分別對各組B細胞上TLR9表達差異進行比較。此外對TLR9的表達情況與SL,EDAI、補體C3水平做相關性分析。 (2)采用免疫組化的方法對57例確診的LN

6、患者腎活檢組織和11例正常腎組織進行TLR9檢測分析，并根據：ISN/RPS病理分型對TLR9在各型表達的程度和差異也進行比較。此外對TLR9的表達與腎臟組織病理學指標、臨床實驗室指標做相關性分析。 結果： (1)活動期LN患者(SLEDAI評分≥10)外周血CD19<'+B>細胞TLR9的表達率高于非活動期LN患者及正常對照組(P<0．01)，而非活動期LN患者B細胞TLR9表達率雖高于正常對照組，但無統(tǒng)計學意義(P>

7、0．05)；且活動期LN患者中應用中小劑量激素和(/或)免疫抑制劑對TLR9在CD19<'+>B細胞的表達無顯著影響(P>0．05)。 (2)LN患者外周血CD19<'+>B細胞TLR9的表達率與SLEDAI評分呈正相關(P<0．01)；與血清補體C3水平無明顯相關性(P>0．05)。 (3)正常腎組織中腎小球內無或有極少量TLR9表達，腎間質僅有少量浸潤的細胞表達。與正常腎組織相比，各型LN患者腎組織中腎小球、。腎間質

8、TLR9表達均較正常腎組織增高(P<0．05)，主要表達于腎臟浸潤的細胞，且TLR9表達與腎臟病理類型的嚴重程度有關，其中ISN/RPS的Ⅳ型LN腎組織TLR9表達水平較Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ型明顯升高(P<0．01)。 (4)LN患者腎組織中腎小球TLR9表達水平與腎小球細胞增殖程度、LN腎臟病理活動指數(shù)(AI)呈正相關(P<0．01)；腎間質TLR9表達水平與AI、腎小管間質損害程度也存在正相關關系(P<0.01)。 (1)LN患者腎組

9、織中腎小球TLR9表達水平與估計的腎小球濾過率(eGFR)呈負相關(P<0.01)、與24小時尿蛋白定量存在正相關(P<0.05)，與血清補體C3水平無相關(P>0.05)；而腎間質TLR9表達水平與eGFR呈負相關(P<0.01)，與24小時尿蛋白定量、補體C3水平均無相關性(P>0.05)。 結論： (1)TLR9在LN患者外周血B細胞表達上調，提示TLR9參與了LN患者B細胞的異?；罨癓N的異常免疫過程。