白介素-17A在子宮內(nèi)膜異位病灶發(fā)生發(fā)展中作用的初步探究.pdf

1、背景：子宮內(nèi)膜異位癥（EM），是指具有生長(zhǎng)功能的子宮內(nèi)膜組織（腺體和間質(zhì)）在子宮內(nèi)膜以外的部位生長(zhǎng)并引發(fā)相應(yīng)的臨床癥狀，包括：疼痛（進(jìn)行性痛經(jīng)、慢性盆腔痛、性交痛）、月經(jīng)失調(diào)和不孕。該疾病組織學(xué)呈良性表現(xiàn)，但具有血管生成、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等惡性行為，且其發(fā)病率較高，在25歲-45歲女性中達(dá)10％-15％，是育齡期女性最常見(jiàn)疾病之一。
　　目前，子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制有多種學(xué)說(shuō)，最為廣泛認(rèn)可的是Sampson的經(jīng)血逆流學(xué)說(shuō)。體腔上皮

2、化生學(xué)說(shuō)、誘導(dǎo)學(xué)說(shuō)也在一定程度上解釋了該病的發(fā)病機(jī)制。異位的子宮內(nèi)膜能否存活并進(jìn)一步發(fā)展成為異位病灶，取決于以下幾個(gè)因素：遺傳、免疫、炎癥和在位內(nèi)膜的特性。其中，免疫和炎癥因素在近年來(lái)的研究中備受關(guān)注。2005年，國(guó)內(nèi)學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)：輕度子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液中Interleukin-17的濃度明顯高于中重度子宮內(nèi)膜異位癥患者和無(wú)內(nèi)異癥者，且Interleukin-17的濃度不隨月經(jīng)周期變化而改變。此后，日本學(xué)者在探究Interleuk

3、in-17和子宮內(nèi)膜異位癥關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)：TH17細(xì)胞存在于子宮內(nèi)膜異位癥患者的腹腔液和異位的子宮內(nèi)膜組織中；他通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)Interleukin-17A能誘導(dǎo)人的異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞分泌Interleukin-8和環(huán)氧合酶-2以及有助于異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞增殖。近期國(guó)內(nèi)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，重度子宮內(nèi)膜異位癥患者腹腔液Interleukin-17濃度高于輕度患者。關(guān)于Interleukin-17和子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)性的研究結(jié)果不盡相同。此外

4、，Interleukin-17A對(duì)異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的作用是根據(jù)體外實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)果，并未進(jìn)行在體實(shí)驗(yàn)。Interleukin-17A是否為子宮內(nèi)膜異位病灶發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素,該細(xì)胞因子在子宮內(nèi)膜異位病灶發(fā)生發(fā)展中的作用如何，是通過(guò)何種方式和通路進(jìn)行作用等都還無(wú)法定論，尚待進(jìn)一步的研究和探索。
　　目的：本研究旨在探索Interleukin-17A和子宮內(nèi)膜異位癥之間的關(guān)系，驗(yàn)證其是否為子宮內(nèi)膜異位病灶發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素，并進(jìn)一步探尋

5、該細(xì)胞因子在異位病灶發(fā)生發(fā)展中所起的作用和可能的作用方式。
　　方法：利用il17a基因敲除（il17a–/–）和il17a野生型（il17a+/+）C57BL/6雌性小鼠建立子宮內(nèi)膜異位癥模型，分別于術(shù)后第10天，20天，30天時(shí)斷頸處死模型小鼠，觀察異位病灶生成情況，測(cè)量記錄病灶大小。取異位病灶組織，采用HE染色評(píng)估模型小鼠異位病灶的生成情況，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)異位病灶組織中環(huán)氧合酶-2（COX-2）表達(dá)情況和微血管密度

6、(MVD)，采用熒光實(shí)時(shí)定量PCR(FQ-PCR)檢測(cè)金屬基質(zhì)蛋白酶-9mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果：il17a基因敲除（il17a–/–）和il17a野生型（il17a+/+）C57BL/6雌性小鼠均能形成典型的子宮內(nèi)膜異位病灶。開(kāi)腹行子宮內(nèi)膜組織自體移植手術(shù)10天以后，兩組模型小鼠均可見(jiàn)子宮內(nèi)膜組織存活，隨病灶生長(zhǎng)，可形成典型的異位囊腫，囊液透亮，囊腫表面血管豐富，組織切片HE染色證實(shí)為子宮內(nèi)膜組織。術(shù)后10天，20天，30天

7、il17a–/–組異位病灶體積均較il17a+/+組大，HE染色結(jié)果評(píng)分顯示i17a–/–組異位內(nèi)膜生長(zhǎng)情況較il17a+/+組好，但二者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)；隨著時(shí)間推移，病灶體積逐漸增大后萎縮變小。il17a–/–組環(huán)氧合酶-2（COX-2）和微血管密度（MVD）均低于il17a+/+組，隨時(shí)間推移，二者的差異性逐漸減小，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。金屬基質(zhì)蛋白酶9mRNA（MMP-9mRNA）在兩組模型小鼠均呈