周細胞在子宮內(nèi)膜異位癥血管生成中作用的研究.pdf

1、目的:本實驗通過測定子宮內(nèi)膜異位癥(EMs，endometriosis)患者異位、在位、正常內(nèi)膜及不同時相的裸鼠異位病灶中周細胞數(shù)目(PN，Pericytes number)、微血管密度(MVD，microvessel density)以及PN/MVD比值，研究探討周細胞在EMs血管生成中的作用。
　　方法:選取EMs患者異位內(nèi)膜20例（異位組）、在位內(nèi)膜40例（增殖期、分泌期各20例）（在位組）及非子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜40

2、例（增殖期、分泌期各20例）（對照組）。利用異體移植方法建立40只裸鼠人EMs模型，并隨機平均分為A組、B組、C組、D組，分別于建模后7天、14天、21天、28天時處死并獲取異位病灶。觀察裸鼠異位病灶肉眼及鏡下組織學(xué)形態(tài)，并采用免疫組化法檢測三組人子宮內(nèi)膜及四組裸鼠異位病灶中PN、MVD的表達，并對二者的比值（PN/MVD）進行比較。
　　結(jié)果:(1)裸鼠EMs模型成功率達100％;(2)人異位內(nèi)膜MVD值高于正常內(nèi)膜和在位內(nèi)膜(

3、P＜0.05)，在位內(nèi)膜無論增殖期還是分泌期與相應(yīng)的正常內(nèi)膜相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，在位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組內(nèi)比較均分泌期高于增殖期(P＜0.05);(3)人異位內(nèi)膜PN值低于正常內(nèi)膜和在位內(nèi)膜(P＜0.05)，在位內(nèi)膜無論增殖期還是分泌期與相應(yīng)的正常內(nèi)膜相比差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，在位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組內(nèi)比較均增殖期高于分泌期(P＜0.05);(4)人異位內(nèi)膜PN/MVD值低于正常內(nèi)膜和在位內(nèi)膜，在位內(nèi)膜無論增殖期還是分泌期均低于相應(yīng)的正常內(nèi)膜

4、(P＜0.05)，在位內(nèi)膜及正常內(nèi)膜組內(nèi)比較均增殖期高于分泌期(P＜0.05);(5)A組裸鼠開腹探查見異位病灶呈清亮水皰狀，鏡下可見點簇狀新生血管形成，MVD=35.70±3.16，B組裸鼠開腹探查見異位病灶呈紅色囊泡狀，表面可見血管走形，鏡下可見腺體增生，間質(zhì)中血管生成明顯，MVD=68.60±9.07，C組裸鼠開腹探查見異位病灶呈暗紅色囊狀或結(jié)節(jié)狀，欠新鮮，鏡下可見腺體豐富、呈增殖期子宮內(nèi)膜表現(xiàn)，間質(zhì)新生血管數(shù)目減少、血管壁結(jié)構(gòu)完

5、整，MVD=53.50±3.57，D組裸鼠開腹探查見異位病灶呈黃白色囊狀或結(jié)節(jié)狀、質(zhì)稍硬，鏡下可見腺體數(shù)目減少，部分腺體及間質(zhì)纖維化，間質(zhì)新生血管數(shù)目進一步減少，可見部分血管結(jié)構(gòu)破壞;MVD=48.00±4.99;四組裸鼠異位病灶MVD值差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);(6)A～D組裸鼠異位病灶中PN與MVD的變化趨勢平行，分別為(27.30±2.50)、(79.40±10.68)、(64.70±4.64)、(38.30±4.50)

6、，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);(7)A～C組裸鼠PN/MVD值呈上升趨勢，在C組裸鼠異位病灶中達到峰值，D組裸鼠異位病灶中PN/MVD值同C組比較呈下降趨勢，但仍高于A組裸鼠，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:(1)采用異體移植方法可在裸鼠體內(nèi)較完整地復(fù)制人類子宮內(nèi)膜異位癥，可實現(xiàn)對EMs發(fā)展過程的動態(tài)觀察及相關(guān)實驗研究，方法可行、成功率高，所得結(jié)果具有參考價值;(2)四組裸鼠異位病灶中PN值隨著病灶中血管的生

7、長、消退發(fā)生相應(yīng)的改變，與相應(yīng)內(nèi)膜中MVD值變化趨勢相一致，提示周細胞在EMs血管生成中起著重要作用;(3) EMs患者異位內(nèi)膜中PN/MVD值低于在位和正常內(nèi)膜，C組裸鼠異位病灶中PN/MVD值達峰值，結(jié)合肉眼與鏡下所見，提示EMs病灶中周細胞覆蓋率與血管穩(wěn)定性高度一致性;(4) EMs患者在位內(nèi)膜無論增殖期還是分泌期中的PN/MVD值均低于相應(yīng)的正常內(nèi)膜，進一步佐證了“在位內(nèi)膜決定論”，在位子宮內(nèi)膜中周細胞覆蓋率低可能是EMs發(fā)病的