氧化異阿樸菲-硫辛酸雙分子雜合體抗AD作用及機制研究.pdf

1、隨著人類平均壽命的逐年增加，全世界范圍內(nèi)的阿爾茨海默病發(fā)病率顯著升高，已嚴重威脅老年人的身體健康。阿爾茨海默病普遍認同的發(fā)病機制包括膽堿能假說、β-淀粉樣蛋白級聯(lián)假說和氧化應激假說。而目前認為抗膽堿酯酶抑制劑是最有效治療藥物，其主要作用靶點為乙酰膽堿酯酶的活性位點。近年來，隨著乙酰膽堿酯酶外周陰離子位點的發(fā)現(xiàn)及其促進淀粉樣蛋白沉積作用被揭示，尋找或合成針對乙酰膽堿酯酶雙位點抑制劑以及偶聯(lián)抗氧化基團的多位點抑制劑成為抗阿爾茨海默病藥物研究

2、熱點。
　　本課題組前期體外試驗證實蝙蝠葛提取物氧化異阿樸菲類生物堿及其化學修飾衍生物具有良好的抗阿爾茨海默病作用，主要作用位點為乙酰膽堿酯酶外周陰離子位點，本研究利用化學合成氧化異阿樸菲-9-位修飾物與硫辛酸雙分子雜合體，通過體外、體內(nèi)試驗，探究氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子的抗AD活性及其作用機制，為后期的新藥開發(fā)提供初步試驗依據(jù)。
　　目的:探究氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子的抗AD活性及其作用機制，為后期的新藥開

3、發(fā)提供初步試驗依據(jù)。
　　方法:(1)體外試驗:
　　a.購買商品化的AChE、BuChE，利用改良Ellman法檢測氧化異阿樸菲-硫辛酸雙雜合體分子抗膽堿酯酶活性;
　　b.利用培養(yǎng)的細胞，MTT法檢測氧化異阿撲菲-硫辛酸雙分子雜合體細胞毒性及對H2O2損傷的保護作用。
　　(2)體內(nèi)實驗:建立Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅模型，設立對照組、溶劑對照組、模型組、不同濃度梯度的給藥組，觀察以下指標:
　　1)果蠅生存率

4、、攀爬能力;
　　2)檢測果蠅腦組織SOD、MDA水平，衡量果蠅腦組織氧化應激水平;
　　3)檢測果蠅腦組織ATP含量，衡量果蠅腦組織線粒體損傷水平;
　　4)果蠅腦組織切片HE染色，比較病理損傷程度。收集數(shù)據(jù)，作統(tǒng)計學分析。
　　結(jié)果與結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)化合物8-11，細胞毒性低，體外都具有不同程度地抗AChE活性，其中以化合物8、9為甚。化合物8-11作用于Aβ42轉(zhuǎn)基因果蠅，顯著降低果蠅腦組織氧化應激水平，減