CO2人工氣腹環(huán)境對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3增殖的影響.pdf

1、目的：通過(guò)研究CO2人工氣腹環(huán)境對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3增殖活性的影響，探討可能的分子機(jī)制和影響時(shí)效，以評(píng)價(jià)CO2氣腹腹腔鏡手術(shù)在卵巢癌中應(yīng)用的安全性。
　　 方法：(1)建立體外模擬CO2氣腹環(huán)境，將人卵巢癌細(xì)胞株SKOV3暴露于不同壓力(8mmHg和12mmHg)的CO2環(huán)境，分別持續(xù)作用2h和4h后，脫離氣腹環(huán)境，放入常規(guī)5％CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h、48h、72h和14d，對(duì)照組在5％CO2、37℃培養(yǎng)箱中持續(xù)

2、常規(guī)培養(yǎng)。
　　 (2)采用MTT比色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)照組與上述各實(shí)驗(yàn)組常規(guī)培養(yǎng)24h、48h和72h后各組細(xì)胞的增殖活性。
　　 (3)采用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組常規(guī)培養(yǎng)14d后的克隆形成率。
　　 (4)采用western-blotting蛋白印跡法檢測(cè)：①對(duì)照組與各實(shí)驗(yàn)組常規(guī)培養(yǎng)24h后各組細(xì)胞中細(xì)胞周期蛋白CyclinD1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF的蛋白表達(dá)；②12mmHg，CO2氣腹環(huán)境作用4h

3、后，脫離氣腹環(huán)境，繼續(xù)常規(guī)培養(yǎng)24h、48h和72h后各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞中CyclinD1和VEGF的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果，(1)SKOV3細(xì)胞在8mmHgCO2人工氣腹分別持續(xù)作用2h、4h后，繼續(xù)常規(guī)培養(yǎng)24h、48h，其OD值均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；常規(guī)培養(yǎng)72h，其OD值與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。(2)SKOV3細(xì)胞在12mmHgCO2人工氣腹分別持續(xù)作用2h、4h后，常規(guī)培養(yǎng)24h、

4、48h，其OD值均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；常規(guī)培養(yǎng)72h，其OD值與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。(3)SKOV3細(xì)胞在8mmHg、12mmHg，分別持續(xù)作用2h、4h后，常規(guī)培養(yǎng)14d，各組細(xì)胞克隆形成率與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。(4)SKOV3細(xì)胞在8mmHg、12mmHgCO2人工氣腹，分別持續(xù)作用2h、4h后，常規(guī)培養(yǎng)24h，各組細(xì)胞中的CyclinD1和VEGF蛋白表達(dá)均高于對(duì)照組(P<0.05

5、)；12mmHgCO2人工氣腹，持續(xù)作用4h后，常規(guī)培養(yǎng)24h、48h，各組細(xì)胞中的CyclinD1和VEGF蛋白表達(dá)均高于對(duì)照組(P<0.05)，常規(guī)培養(yǎng)72h，該兩種蛋白表達(dá)與對(duì)照組比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：(1)CO2氣腹環(huán)境可促進(jìn)卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖，所發(fā)生的改變72h內(nèi)可發(fā)生可逆性恢復(fù)；(2)CO2氣腹環(huán)境可促進(jìn)CyclinD1和VEGF蛋白表達(dá)增加，氣腹作用4h內(nèi)所引起的改變72h內(nèi)