產(chǎn)丁二酸菌種篩選及發(fā)酵工藝條件優(yōu)化的研究.pdf

1、琥珀酸是一種二元羧酸，在三羧酸循環(huán)中產(chǎn)生，同時也是厭氧發(fā)酵的代謝產(chǎn)物之一。琥珀酸作為一種重要的化學(xué)合成前體，廣泛應(yīng)用于食品、化學(xué)和醫(yī)藥工業(yè)。微生物發(fā)酵法生產(chǎn)琥珀酸成為綠色工藝不僅是因?yàn)槔每稍偕Y源，而且在發(fā)酵過程利用CO2減少了溫室效應(yīng)。因此，微生物發(fā)酵法生產(chǎn)琥珀酸是具有發(fā)展前景的方法之一。本論文對厭氧發(fā)酵琥珀酸產(chǎn)生菌的篩選、初步鑒定及發(fā)酵工藝進(jìn)行了研究，主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下： 建立一種快速經(jīng)濟(jì)的琥珀酸定性半定量分析方法化學(xué)

2、熒光圈法。能滿足菌種篩選過程對琥珀酸分析的要求，是經(jīng)濟(jì)、有效的分離和篩選產(chǎn)琥珀酸菌種的方法。 研究了用于分析有機(jī)酸的HPLC條件。高效液相色譜儀為安捷倫1100，色譜柱為安捷倫ZORBAXSB—Aq柱(150mm×4.6mm，5μm)，進(jìn)樣量10μL，流動相流速0.5mL/min，檢測波長210nm，流動相：0.5％乙腈、99.5％0.02mol/LKH2PO4、調(diào)pH至2.0(用磷酸調(diào)節(jié))，柱溫30℃。 從牛的瘤胃中分

3、離得到產(chǎn)琥珀酸菌株JNUBE0709，初步發(fā)酵實(shí)驗(yàn)琥珀酸濃度為9.45g/L，且該菌產(chǎn)生的雜酸種類相對較少，以甲酸、乙酸為主，因此將JNUBE0709作為本論文實(shí)驗(yàn)的出發(fā)菌。對產(chǎn)琥珀酸JNUBE0709基本生理生化性質(zhì)鑒定，多數(shù)生理生化特征與琥珀酸放線桿菌相似。初步鑒定此菌種為產(chǎn)琥珀酸放線桿菌。 通過單因素試驗(yàn)確定影響JNUBE0709發(fā)酵產(chǎn)琥珀酸三個顯著因素，并進(jìn)一步采用響應(yīng)面分析顯著因素的濃度范圍。優(yōu)化后最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為