納豆芽孢桿菌作為奶牛飼用微生物效果研究.pdf

1、納豆芽孢桿菌已被我國(guó)飼料主管部門批準(zhǔn)為微生物飼料添加劑，但是將其做為奶牛飼用微生物的使用效果還缺乏研究。為此，本論文對(duì)納豆芽孢桿菌菌株的純化與生長(zhǎng)條件、在人工瘤胃中對(duì)瘤胃微生物發(fā)酵的影響和飼喂?fàn)倥ＰЧ齻€(gè)方面進(jìn)行了初步研究。通過多種培養(yǎng)基的篩選、生長(zhǎng)曲線測(cè)定篩選出4號(hào)菌株，并對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化。利用生理生化試驗(yàn)參照《伯杰斯細(xì)菌鑒定手冊(cè)》和16SrDNA基因序列分析鑒定該菌株，結(jié)果表明4號(hào)菌為枯草芽孢桿菌亞種(Bacillussubti

2、lissubspsubtilis)。篩選的最佳培養(yǎng)條件組合為葡萄糖1％、蔗糖1％、大豆蛋白胨6％、胰蛋白胨4％、接種量2％、裝液量5ml/100ml，該組合菌液在180r/min，37℃條件下發(fā)酵24h時(shí)，660nm吸光度值達(dá)到1.1475。本試驗(yàn)篩選的最佳培養(yǎng)條件為180r/min和37℃。小試擴(kuò)繁中液體發(fā)酵和固體發(fā)酵結(jié)果比較穩(wěn)定，單位細(xì)菌數(shù)均在1010cFu/ml。固體發(fā)酵的最佳培養(yǎng)時(shí)間為36h。人工瘤胃評(píng)價(jià)結(jié)果表明。添加1％和5％

3、的納豆芽孢桿菌均提高了瘤胃液中揮發(fā)性脂肪酸各成分含量，表明其具有提高瘤胃微生物消化代謝碳水化合物的能力。納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物對(duì)人工瘤胃的pH值、NH3-N、MCP和揮發(fā)性脂肪酸都有不同程度的影響，主要表現(xiàn)在添加1％和5％納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物后，pH值顯著高于對(duì)照組，可提高瘤胃液的pH值；添加5％納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物使NH3-N濃度顯著高于對(duì)照組，添加1％的納豆芽孢桿菌，在培養(yǎng)13h后NH3-N濃度低于對(duì)照組；添加1％和5％納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物后

4、，乙酸、丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量與對(duì)照組相比顯著增加，表明其具有提高瘤胃微生物消化代謝碳水化合物的能力。添加納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物使瘤胃內(nèi)環(huán)境NH3-N濃度較高，MCP值顯著降低，這一結(jié)果表明，納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物與瘤胃微生物菌群存在互作關(guān)系，需要進(jìn)一步研究納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物與瘤胃內(nèi)不同種類細(xì)菌以及原蟲之間的消長(zhǎng)機(jī)理。選取14頭7日齡中國(guó)荷斯坦奶牛公犢牛，隨機(jī)分為2個(gè)處理組，向所飼喂的牛奶中添加納豆芽孢桿菌培養(yǎng)物，連續(xù)飼喂直到自然斷奶。