飼用納豆芽孢桿菌微生態(tài)制劑的研制與開發(fā).pdf

1、納豆屬功能食品，納豆菌是農業(yè)部批準的可用于飼料的微生物菌種之一。本文進行了納豆菌的分離鑒定、篩選；研究了以豆粕為主要原料，生產納豆菌飼用微生態(tài)制劑的生產工藝，并進行了發(fā)酵產物的營養(yǎng)和功能評價；在此基礎上進行了中試及中試產品的動物喂養(yǎng)試驗，得到以下結果： (1)菌株分離和分子鑒定。共分離了7個菌株，對其中4個菌株natto1，3，4，6和標準菌株natto0做16SrDNA測序，結果表明所測菌株與GenBank報道的納豆芽孢桿菌B

2、acillussubtilissubsp.Natto(AY608741)16SrDNA同源性達到99％，表明屬納豆芽孢桿菌。 (2)菌株篩選。通過菌株對溫度、pH和通氣的耐受性進行篩選。結果顯示不同菌株間耐熱、耐酸、耐缺氧差異顯著，其中菌株4綜合性能最佳，適合作為生產菌株。通過對納豆菌生存性能觀察，發(fā)現(xiàn)該菌對膽鹽有較強的耐受性，對青霉素敏感，且對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌具有抑制作用。 (3)固體發(fā)酵和干燥工藝。固體發(fā)酵生

3、長曲線圖表明發(fā)酵16h時納豆菌數達到高峰。工藝優(yōu)化結果表明，當豆粕含水量60％，浸泡水pH6.5，添加NaCl0.30％，葡萄糖5％，明膠5％時較適合納豆菌生長；發(fā)酵豆粕與玉米粉的適宜配比為1∶1；產品在65℃以下,60min以內干燥活菌數變化不顯著，75℃以上的高溫處理會導致活菌數顯著下降。 (4)豆粕發(fā)酵過程中營養(yǎng)功能成分變化分析。結果表明，發(fā)酵后酸性蛋白酶酶活和肽的含量提高，其中酸性蛋白酶酶活在發(fā)酵12h時含量達到最高，肽

4、含量在發(fā)酵14～16h時達到最高。發(fā)酵后蛋白質含量有所下降。經過16h發(fā)酵，部分蛋白質降解，使培養(yǎng)基中增加了分子量介于2561～4000的肽類，絕大部分肽的分子量由發(fā)酵前的1100降低至800以下。 (5)產品的中試、營養(yǎng)評價和動物試驗。按照優(yōu)化得到的生產工藝進行了中試，中試產品的納豆菌含量為7.5×108cfu/g，高于農業(yè)部標準(1×108cfu/g)。與發(fā)酵前相比，產品的肽、VB2和吡啶二羧酸的含量均有大幅度提高。飼料中添