梔子苷對大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450酶系活性的影響.pdf

1、目的:研究中藥梔子有效成分梔子苷的不同劑量對大鼠肝毒性的影響;研究梔子苷對大鼠肝微粒體中CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2酶活性的影響。旨在從細(xì)胞色素P450酶系的方向上闡明一些梔子苷肝保護(hù)和肝毒性作用的分子機(jī)理,確定影響細(xì)胞色素P450氧化酶的亞型,并對其進(jìn)行定量研究。
　　方法:SD大鼠雌雄各半,隨機(jī)分成空白對照組、梔子苷藥物組(小劑量組、中劑量組、大劑量組),每組10只,空白對照組給予雙蒸水、藥物組分別給予62.5,1

2、25,250mg/kg的梔子苷水溶液,各組動物連續(xù)灌胃3d,禁食24h后,第4天大鼠股動脈取血后斷頭處死。檢測血清ALT,AST,TBIL。肝臟稱重,計(jì)算肝臟指數(shù),肝臟指數(shù)=肝重/體重×100％。取肝臟組織固定于10%的甲醛中,石蠟包埋切片,HE染色,光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行病理觀察。制備肝微粒體-80℃?zhèn)溆?采用酶和底物體外孵育的辦法,通過高效液相色譜和紫外可見分光光度計(jì)對其特異性產(chǎn)物的絕對定量來比較各處理組細(xì)胞色素P450同工酶的活性,以確

3、定梔子苷對細(xì)胞色素P450同工酶的影響。
　　結(jié)果:對大鼠生存狀態(tài)、肝臟指數(shù)、肝功能及肝臟組織病理變化的比較,梔子苷大劑量組比小、中劑量組的大鼠生存狀態(tài)差;梔子苷小、中、大劑量組大鼠肝指數(shù)較空白對照組高,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而梔子苷各劑量組肝指數(shù)較相近,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);大鼠肝功能測定結(jié)果顯示,梔子苷大劑量組ALT、AST、TBIL明顯高于空白對照組,梔子苷小、中劑量組,差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01

4、);肝臟病理損傷嚴(yán)重;經(jīng)對CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2酶的活性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,確認(rèn)梔子苷不同劑量組對這三種亞型酶存在不同的影響。
　　結(jié)論:從大鼠生存狀態(tài)、肝臟指數(shù)、肝功能及肝臟組織病理變化方面,提示梔子苷對大鼠的肝臟存在雙重作用,作用的結(jié)果是小劑量能保護(hù)肝臟,大劑量能使動物肝臟產(chǎn)生毒性;從CYP1A2、CYP2E1和CYP3A2酶的活性變化方面,梔子苷小劑量對三個亞型酶都呈誘導(dǎo)作用,梔子苷大劑量對三個同工酶都呈抑制作