玫瑰花中原花青素的分離分析及抗氧化活性研究.pdf

1、玫瑰花是我國傳統(tǒng)藥材之一，《本草綱目拾遺》載：“玫瑰花活血、行血、健脾降火、理氣調(diào)經(jīng)、滋補(bǔ)養(yǎng)顏”，其養(yǎng)顏美容的功效被廣泛接受。原花青素是具有極強(qiáng)抗氧化能力的多酚類物質(zhì)，藥理作用廣泛，目前國外已制成多種藥品、保健品、化妝品上市，是一種很有開發(fā)前途的天然抗氧化劑。本文主要研究玫瑰花中原花青素的提取及純化工藝，并建立玫瑰花原花青素中單體和二聚體的HPLC分析方法，最后對玫瑰花原花青素的抗氧化能力進(jìn)行評價(jià)。 本論文首先采用微波法從玫瑰花

2、中提取原花青素，通過單因素實(shí)驗(yàn)考察了微波反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)次數(shù)和料液比對提取率的影響，最終確定提取條件為：60％乙醇為溶劑，料液比1:20，微波功率5.00V，微波反應(yīng)時(shí)間20min，反應(yīng)次數(shù)為1次，原花青素的提取率達(dá)到1.59％。并將微波法與傳統(tǒng)溶劑浸提法進(jìn)行了對比，結(jié)果表明微波法下原花青素的提取率高于溶劑浸提法. 繼而采用大孔吸附樹脂柱進(jìn)一步純化初提液，首先通過靜態(tài)實(shí)驗(yàn)從五種樹脂(D101、D1300、NKA，AB-8和NKA-

3、Ⅱ)中篩選出適合純化原花青素的樹脂型號，以飽和吸附量和解吸率為指標(biāo)綜合考慮，結(jié)果顯示：D101型樹脂綜合性能最好，其靜態(tài)飽和吸附量為9.3mg/g濕樹脂，解吸率為77.20％。論文進(jìn)一步通過正交實(shí)驗(yàn)考察了純化工藝參數(shù)，包括上樣濃度、上樣pH、洗脫液濃度、洗脫流速四個(gè)因素，以原花青素純度和回收率為指標(biāo)，極差分析和方差分析結(jié)果表明：上樣pH是影響最顯著的因素，最優(yōu)純化工藝條件為：上樣濃度為1.25mg/ml，上樣pH為2，洗脫液濃度為70％

4、，洗脫流速為2ml/min。本文還對樹脂純化過程的動力學(xué)特征進(jìn)行了初步探索，繪制了滲漏及洗脫曲線，并用數(shù)學(xué)方法將滲漏曲線擬合為y=1.18(e0.31x-e-0.79x)，由此方程積分可得出樹脂的動態(tài)飽和吸附量即最大上樣濃度。 論文進(jìn)一步建立了玫瑰花原花青素中單體及二聚體的HPLC分析方法，具體色譜條件為：分析柱：EslipseXDB-C18，4.6mm×150mm，5μm；流動相：A：乙腈，B：1.0％冰醋酸(pH=2.71)

5、；洗脫梯度：0-10min：5-10％A；10-100min：10-25％A；流速：1.0ml/min；檢測波長：280nm；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μl。在此條件下，四種物質(zhì)(兒茶素、表兒茶素、表兒茶素沒食子酸酯和原花青素B2)的分離度、方法的線性、精密度和加樣回收率均符合要求。定量分析結(jié)果顯示：原花青素B2的含量最高，達(dá)2.54％，表兒茶素含量為0.612％，表兒茶素沒食子酸酯含量為0.257％。 論文最后將純化得到的玫瑰