液態(tài)發(fā)酵美味牛肝菌生成殼聚糖的研究.pdf

1、殼聚糖（Clutosan，簡稱CS）又稱聚氨基-D-葡萄糖，是幾丁質(zhì)的脫乙酰產(chǎn)物，它是自然界中唯一存在的堿性多糖。由于其特殊的性質(zhì)，殼聚糖被廣泛應用在藥物制劑學、印染、化工、食品、農(nóng)業(yè)等方面。目前，殼聚糖的工業(yè)化生產(chǎn)原料主要來自于蝦、蟹的外殼，該原料制備殼聚糖的提取方法耗能較高，對環(huán)境有污染，且原料受季節(jié)和產(chǎn)地的影響較大。自從上世紀證實在真菌菌絲體細胞壁中有甲殼素存在以來，有關從真菌菌絲中提取殼聚糖的報道不斷涌現(xiàn)。但是大部分研究側(cè)重于提

2、取方法的研究，對高產(chǎn)菌株的篩選與培養(yǎng)條件的優(yōu)化的研究卻不多。本實驗主要通過利用對實驗室保藏的擔子菌門牛肝菌科的美味牛肝菌液態(tài)發(fā)酵，研究得出高產(chǎn)殼聚糖的菌株培養(yǎng)基主要組成成分和培養(yǎng)條件，并對發(fā)酵液中分離提取的目的物進行測定，主要研究結(jié)果如下：
　　 實驗首先通過對美味牛肝菌液態(tài)發(fā)酵生成殼聚糖的主要營養(yǎng)成分，碳源、氮源及實驗條件的單因子優(yōu)化，確定了美味牛肝菌發(fā)酵的最佳基礎培養(yǎng)基，結(jié)果表明美味牛肝菌發(fā)酵生成殼聚糖的最佳碳源是葡萄糖，氮

3、源是酵母浸出粉。并對其發(fā)酵條件進行單因子優(yōu)化，結(jié)果表明：在250mL三角瓶中美味牛肝菌的液態(tài)發(fā)酵生成殼聚糖的最適pH5.5，溫度28℃，裝液量80mL，發(fā)酵天數(shù)6天。
　　 在單因子研究基礎上選擇葡萄糖，酵母浸出粉和對實驗結(jié)果影響較為明顯的兩個發(fā)酵條件因素pH，裝液量共四因子，使用DPS數(shù)據(jù)處理軟件，設計響應曲面統(tǒng)計方法（RSM），優(yōu)化出美味牛肝菌發(fā)酵生成殼聚糖的最佳條件。結(jié)果顯示：以250mL三角瓶作為發(fā)酵搖瓶，采用葡萄糖30

4、.53g/L作為碳源，酵母浸出粉7.02g/L作為氮源，在發(fā)酵溫度為28℃，裝液量達77.42mL，起始pH為5.64的條件下發(fā)酵6天，獲得殼聚糖最大積累量為3.81g/L，占菌絲體干重的15.43％。實驗的驗證結(jié)果表明該方程有較好的擬合性。
　　 通過對產(chǎn)物進行紅外光譜（IR）和紫外光譜（UV）的定性分析，確認了從美味牛肝菌中提取的物質(zhì)為殼聚糖，并且達到了較高的脫乙酰度和純度，具有較好的品質(zhì)。
　　 利用從美味牛肝菌中