Cathepsin L在X射線誘導(dǎo)的人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞侵襲中的作用.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：研究溶酶體組織蛋白酶L(Cathepsin L)在X射線誘導(dǎo)的人腦膠質(zhì)瘤侵襲遷移中的作用及調(diào)控機(jī)制。
　　方法：采用Cathepsin L特異性抑制劑Z-FY-CHO或shRNA干擾的方式降低U251細(xì)胞中Cathepsin L的表達(dá)，并聯(lián)合X射線處理細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U251細(xì)胞的遷移、侵襲能力的改變；Western blot和免疫熒光法檢測(cè)各處理組細(xì)胞中Cathepsin L的變化及侵襲

2、相關(guān)蛋白R(shí)hoA、CDC42、MMP-2、MMP-9、CXCR4、CCR7的表達(dá)；Rho/CDC42 Activation Assay的方法測(cè)定細(xì)胞骨架蛋白R(shí)hoA及CDC42的活性蛋白；鬼筆環(huán)肽染色及免疫熒光法觀察細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的改變。
　　結(jié)果：X射線能明顯增加U251細(xì)胞Cathepsin L蛋白的表達(dá)，并增強(qiáng)細(xì)胞的遷移及侵襲能力。Z-FY-CHO及Cathepsin L shRNA可減少由X射線誘導(dǎo)的Cathepsin L的

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