兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)及硝普鈉對其凋亡影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：熟練掌握實(shí)驗(yàn)室相關(guān)儀器的操作，培養(yǎng)無菌操作的實(shí)驗(yàn)觀念，進(jìn)行兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分離及培養(yǎng)，觀察兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)的生物學(xué)形態(tài)，進(jìn)行不同濃度的硝普鈉作用不同的時(shí)間后誘導(dǎo)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)，并檢測其凋亡率，來探討一氧化氮(NO)供體硝普鈉(SNP)誘導(dǎo)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的機(jī)制及關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡與骨關(guān)節(jié)炎(OA)的發(fā)生機(jī)制。 方法： 1．在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行不同實(shí)驗(yàn)儀器的操作。 2．在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無菌操作的動手鍛煉。

2、 3．在凈化操作臺上進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)試劑的配制。 4．在凈化操作臺上進(jìn)行兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分離和培養(yǎng)。 5．在CO2培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的培養(yǎng)。 6．在顯微鏡下觀察兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的生物學(xué)形態(tài)。 7．在凈化操作臺上進(jìn)行不同濃度的硝普鈉作用不同的時(shí)間后誘導(dǎo)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)操作。 8．用流氏細(xì)胞儀檢測兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡，并對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1．對兔關(guān)節(jié)軟骨

3、細(xì)胞生物學(xué)形態(tài)有了初步的認(rèn)識。 2．成功建立NO供體SNP誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡的模型3．軟骨細(xì)胞凋亡與SNP有一定的量效和時(shí)效關(guān)系。 4．不同的濃度組，不同的時(shí)間組采用組間配伍組設(shè)計(jì)資料的方差分析具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。 5.2mmol/L濃度的硝普鈉誘導(dǎo)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡，培養(yǎng)24小時(shí)后，其凋亡率明顯高于其他濃度和其他時(shí)間的對照組(p＜0.01)。 結(jié)論： 通過成功建立NO供體SNP誘導(dǎo)軟骨