手法對兔膝關(guān)節(jié)NO水平及軟骨細胞凋亡影響的實驗研究.pdf

1、目的：研究手法對實驗兔膝關(guān)節(jié)液一氧化氮（NO）含量和膝骨關(guān)節(jié)炎(KOA)軟骨細胞凋亡的影響及探討其作用機制。
　　方法：24只新西蘭兔隨機分成三組，造模組20只，正常組4只。造模組隨機分為手法組10只，對照組10只。造模組動物通過手術(shù)結(jié)扎右側(cè)股靜脈和臀下靜脈方法造模，正常組不作任何處理。手法組從第二周(造模后第8天)開始進行手法治療，共5周。對照組和正常組不治療。于第8周末處死所有動物，抽取右膝關(guān)節(jié)液采用硝酸還原酶法檢測NO含量；

2、并取右膝關(guān)節(jié)脛骨平臺內(nèi)側(cè)軟骨制片，切片采用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（terminal deoxy-nucleotidyl transf-erase mediated nick-end-labeling，TUNEL）標(biāo)記，在光鏡下進行凋亡細胞形態(tài)學(xué)觀察。
　　結(jié)果：手法組右膝關(guān)節(jié)液中 NO含量為54.62±15.8μmol∕L，對照組為72.47±16.4μmol∕L，正常組為49.23±14.5μmol∕L。N

3、O含量手法組與對照組比較 p＜0.05，有顯著差異。病理切片中正常組見關(guān)節(jié)軟骨表面光滑，軟骨細胞層次結(jié)構(gòu)清晰，表層細胞小而扁平，向下細胞增大并呈柱狀排列，少見細胞分裂。正常組從表層至輻射層各層細胞形態(tài)清晰，各層細胞未見或少見細胞體積萎縮，細胞核固縮等細胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變。對照組見軟骨表面不光滑，表層軟骨變薄，粗糙，軟骨表面出現(xiàn)多個裂隙，可見裂隙從表層延伸向下達輻射層，裂隙中可見稀疏結(jié)締組織及松散的網(wǎng)狀連接，軟骨下骨增厚，整個軟骨細胞排列

4、紊亂，層次結(jié)構(gòu)不易辨認。裂隙周圍可見表現(xiàn)為凋亡形態(tài)的脫水固縮軟骨細胞，軟骨細胞胞體固縮，核染色質(zhì)邊集。表層有部分軟骨剝落，形成缺損區(qū)，表現(xiàn)出多個空陷窩，軟骨細胞部分消失。手法組見關(guān)節(jié)軟骨表面粗糙，但裂隙表淺，軟骨細胞排列較對照組密集且整齊。裂隙周圍可見部分軟骨細胞表現(xiàn)為胞體固縮，核染色質(zhì)邊集的凋亡形態(tài)，部分細胞表現(xiàn)為相對正常的軟骨細胞形態(tài)。但與對照組相比其凋亡細胞所占軟骨細胞數(shù)目比例明顯低于對照組。
　　結(jié)論：手法對防治實驗兔膝關(guān)