人參皂甙對(duì)培養(yǎng)軟骨細(xì)胞代謝作用實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文研究目的：骨性關(guān)節(jié)炎和軟骨缺損后自身修復(fù)能力有限，常因無(wú)力承擔(dān)各種應(yīng)力而退變，臨床療效不佳。目前，關(guān)于促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨缺損的修復(fù)、提高修復(fù)質(zhì)量方面的研究頗多，但沒(méi)有一種方法能高質(zhì)量的修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損，并達(dá)到很好的遠(yuǎn)期療效。尋求一種新的方法和手段提高本病療效已成為必需。 研究材料與方法： 1.建立軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)體系，甲苯胺藍(lán)染色進(jìn)行軟骨細(xì)胞鑒定采用兩步法進(jìn)行軟骨細(xì)胞分離、培養(yǎng)和傳代。并用甲苯胺藍(lán)染色行細(xì)胞鑒定。

2、2.人參皂甙Rg1、Rb1對(duì)軟骨細(xì)胞增殖和蛋白合成的影響設(shè)人參皂甙Rg1、Rb1高、中、低劑量組，對(duì)照組和空白組。運(yùn)用MTT法和Bradford蛋白檢測(cè)法檢測(cè)人參皂甙對(duì)軟骨細(xì)胞合成代謝的促進(jìn)作用。 3.人參皂甙Rg1、Rb1對(duì)IL-1誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞凋亡的抑制作用建立軟骨細(xì)胞凋亡模型，流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst檢測(cè)和透射電鏡對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡進(jìn)行定量、定性、形態(tài)和細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察。 研究結(jié)果： 1.建立軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)體

3、系和細(xì)胞鑒定消化時(shí)間為(6.17±1.63)h，細(xì)胞獲得率(1.43±0.24)×105/100mg，存活率(84.17±5.08)％，24h貼壁率(59.17±7.36)％。 2.人參皂甙Rg1、Rb1對(duì)軟骨細(xì)胞增殖及蛋白合成的促進(jìn)作用人參皂甙Rg1、Rb1明顯促進(jìn)細(xì)胞增殖和蛋白合成，細(xì)胞飽滿，折光度好，分泌大量基質(zhì)，形成軟骨樣組織。Bradford蛋白定量檢測(cè)人參皂甙組蛋白合成量明顯高于對(duì)照組；Rg1促進(jìn)蛋白合成能力明顯高于

4、Rb1。 3.人參皂甙Rg1、Rb1對(duì)IL-1誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡的抑制作用人參皂甙Rg1、Rb1能明顯抑制IL-1介導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡，兩組之間無(wú)明顯差異性。人參皂甙的這種保護(hù)作用在細(xì)胞形態(tài)學(xué)和超微結(jié)構(gòu)上得到直接證明。 研究結(jié)論：合適濃度的人參皂甙Rg1、Rb1能明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞的增殖和蛋白的合成；人參皂甙Rg1m、Rb1m抑制白介素-1介導(dǎo)引起的細(xì)胞凋亡，有效地保護(hù)軟骨細(xì)胞，達(dá)到防止軟骨退變的目的，但兩者之間無(wú)明