阿勒泰大尾羊FTO基因表達(dá)的時(shí)空特異性及其與脂肪沉積的相關(guān)性研究.pdf

1、新疆肉用綿羊多為脂臀型品種，雖肉用性能良好，但尾脂過大，有些品種的尾脂甚至占體重的17％以上。如何降低尾脂而又不影響肌內(nèi)脂肪含量，一直是困擾新疆綿羊優(yōu)良肉質(zhì)性狀，種質(zhì)資源利用的關(guān)鍵問題，而解決的關(guān)鍵是深入了解綿羊體內(nèi)各部位脂肪沉積規(guī)律的差異及相關(guān)調(diào)節(jié)因子表達(dá)變化，探索這些差異形成的機(jī)理。脂肪和肥胖相關(guān)基因(Fat mass and obesity associated gene，F(xiàn)TO)是第一個(gè)與普通肥胖相關(guān)的基因，與脂肪沉積和代謝相關(guān)

2、激素及基因的表達(dá)有關(guān)，且在肌肉和脂肪的表達(dá)差異顯著。目前，綿羊FTO基因表達(dá)的時(shí)空特異性及與脂肪沉積相關(guān)性研究鮮為報(bào)道。本試驗(yàn)以雄性阿勒泰大尾羊?yàn)檠芯繉ο螅芯科洳煌课籉TO基因表達(dá)和脂肪沉積發(fā)育性規(guī)律的差異及相關(guān)性，同時(shí)測定與脂肪代謝相關(guān)激素和基因表達(dá)的水平;探索FTO基因和主要調(diào)節(jié)因子與脂肪沉積的關(guān)系。
　　1.不同部位脂肪細(xì)胞形態(tài)的研究
　　為了研究阿勒泰大尾羊不同部位脂肪組織沉積的變化規(guī)律，分別采集了90日齡時(shí)腎周

3、脂和尾脂組織樣品及270日齡時(shí)腎周脂、尾脂、皮下脂組織樣品，采用改進(jìn)的冰凍脂肪組織切片油紅O滴染技術(shù)，運(yùn)用Motic顯微數(shù)字圖像處理系統(tǒng)，測定脂肪組織面積。本試驗(yàn)研究結(jié)果顯示:90日齡阿勒泰羊尾脂脂肪細(xì)胞面積極顯著高于同日齡阿勒泰大尾羊腎周脂脂肪細(xì)胞面積(P＜0.01)，270日齡時(shí)尾脂和皮下脂肪細(xì)胞面積都極顯著高于腎周脂(P＜0.01)，但脂肪細(xì)胞的面積在尾脂和皮下脂肪之間無顯著差異。從90日齡至270日齡時(shí)，腎周脂細(xì)胞面積呈增加的趨

4、勢，而尾脂細(xì)胞的面積呈減少的趨勢。
　　2.脂代謝相關(guān)酶和激素的測定
　　為研究90日齡和270日齡阿勒泰大尾羊血脂指標(biāo)和脂肪沉積的關(guān)系，采用放射性免疫和酶聯(lián)免疫法，測定了血清中7種酶和9種激素生理生化指標(biāo)。本試驗(yàn)研究結(jié)果:阿勒泰大尾羊90日齡瘦素極顯著高于270日齡(P＜0.01);阿勒泰大尾羊90日齡谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷酰轉(zhuǎn)氨酶的濃度極顯著地低于270日齡(P＜0.01);阿勒泰大尾羊90日齡激素敏感酯酶的濃度顯著地高于270

5、日齡(P＜0.05)。
　　3.FTO基因表達(dá)與脂肪沉積的關(guān)系
　　為了研究阿勒泰大尾羊FTO基因表達(dá)的時(shí)空特異性及其與脂肪沉積的相關(guān)性。采用熒光定量 PCR與蛋白免疫印跡方法，測定了各組織與不同部位脂肪組織中FTO mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示:FTO基因在下丘腦、海馬、心肌背最長肌、心肌、腎臟、肝臟、海馬和垂體中都有表達(dá)。90日齡阿勒泰大尾羊下丘腦中FTO mRNA表達(dá)水平極顯著高于各部位脂肪組織。90日齡阿勒泰大尾

6、羊FTO mRNA在海馬中表達(dá)水平最高，其次是垂體，并且極顯著高于背最長肌、心肌、腎臟、肝臟等組織的表達(dá)水平(P＜0.01)。270日齡時(shí)與90日齡時(shí)FTO基因在各器官中的表達(dá)豐度趨勢基本一致，但在腎臟和肝臟中FTO mRNA表達(dá)水平極顯著低于背最長肌(P＜0.01)，海馬和垂體中的表達(dá)水平極顯著高于背最長?。≒＜0.01）。90日齡阿勒泰大尾羊尾脂F(xiàn)TO mRNA表達(dá)水平與腎周脂、心周脂的無顯著差異。然而在270日齡，尾脂中FTO m

7、RNA的表達(dá)水平顯著高于腎周脂、心周脂和皮下脂肪(P＜0.05)。270日齡脂肪組織中FTO蛋白的表達(dá)檢測顯示，尾脂同樣顯著高于腎周脂和皮下脂肪的(P＜0.05)。
　　4.FTO蛋白在各脂肪細(xì)胞中的定位
　　為進(jìn)一步確定FTO蛋白在脂肪細(xì)胞中的定位，對阿勒泰大尾羊不同部位脂肪組織脂肪細(xì)胞應(yīng)用免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)以及激光共聚焦顯微鏡技術(shù)觀察FTO蛋白的定位。結(jié)果顯示:FTO蛋白在腎周脂和尾脂脂肪細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)邊緣及胞質(zhì)中出現(xiàn)。<

8、br>　　結(jié)論:
　　1.阿勒泰大尾羊不同部位的脂肪細(xì)胞面積存在時(shí)空差異性，尾脂的脂肪細(xì)胞面積高于其他部位的脂肪組織，270日齡較90日齡尾脂脂肪細(xì)胞面積有減少的趨勢，而其他部位脂肪組織隨著日齡的增長，細(xì)胞面積也逐漸增加。
　　2.不同日齡的阿勒泰大尾羊血清中瘦素、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷酰轉(zhuǎn)氨酶、激素敏感酯酶濃度存在差異性。
　　3.FTO mRNA和蛋白在阿勒泰大尾羊不同日齡的各組織存在時(shí)空特異性，在270日齡時(shí)尾脂中FTO