AG490對人宮頸癌Hela細胞增殖及侵襲性的影響及機制.pdf

1、目的：探討JAK2激酶(Janus kinase2，JAK2)特異性抑制劑AG490(tyrphosin AG490)對人宮頸癌Hela細胞增殖，凋亡及侵襲轉移能力的影響及其機制。 方法：(1)培養(yǎng)宮頸癌Hela細胞，觀察活細胞生長情況并攝片，同時繪制細胞的生長曲線。(2)實驗分組：終濃度為25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L的酪氨酸激酶抑制劑AG490培養(yǎng)Hela細胞。(3)MTT比色法檢測培養(yǎng)24 h，48

2、 h，72 h后細胞的增殖活力，并計算細胞生長抑制率；(4)流式細胞儀檢測24 h，48 h，72 h后細胞凋亡的發(fā)生率，并分析細胞周期改變。(5)運用蛋白質印跡法(Western blot)檢測AG490作用的Hela細胞中信號傳導與轉錄激活因子3(Signal transducers and activators of transcription3，STAT3)、磷酸化STAT3(P-STAT3)、基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)和

3、血管內皮生長因子(VEGF)蛋白的表達。 結果：AG490能有效抑制體外培養(yǎng)的Hela細胞增殖，該抑制作用具有濃度與時間依賴性的特點；AG490誘導宮頸癌Hela細胞凋亡，且隨作用時間延長，凋亡率增加；AG490可阻止Hela細胞G1期向S期的轉化，細胞周期主要被阻滯于G1期；AG490能抑制p-STAT3， MMP-2，VEGF蛋白在Hela細胞中的表達。 結論： 1.宮頸癌Hela細胞系中JAK2/STAT3

4、信號通路持續(xù)活化。 2.JAK2激酶抑制劑AG490可以抑制Hela細胞增殖，具有濃度和時間依賴性。 3.JAK2激酶抑制劑AG490使凋亡細胞明顯增多，呈時間依賴性，可阻止Hela細胞G1期向S期的轉化，細胞主要被阻滯在G1期。 4.JAK2激酶抑制劑AG490可以下調Hela細胞中P-STAT3，MMP-2和VEGF的表達，抑制宮頸癌Hela細胞侵襲轉移能力。 5.AG490通過阻斷JAKs/STAT