早期腦創(chuàng)傷的擴(kuò)散加權(quán)成像、病理與AQP4表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分早期腦創(chuàng)傷組織的擴(kuò)散加權(quán)成像與病理變化
　　目的:探討大鼠早期腦創(chuàng)傷(traumatic brain injury，TBI)后腦組織彌散加權(quán)磁共振成像(diffusion-weighted magnetic resonanceimaging，DW-MRI)、表觀擴(kuò)散系數(shù)(apparent diffusion coefficient，ADC)與病理變化。
　　方法:選健康成年Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為對(duì)照組和創(chuàng)傷

2、組(TBI)，創(chuàng)傷組按改良Feeney法制作早期腦創(chuàng)傷模型，創(chuàng)傷組按致傷后時(shí)間點(diǎn)再分為5個(gè)亞組—1h、3h、6h、12h、24h，每組10只。對(duì)照組除不撞擊之外其他操作同TBI組。對(duì)各組分別進(jìn)行DW-MRI檢查，測量損傷區(qū)DW-MRI高信號(hào)面積(rs-DWI)及高信號(hào)面積區(qū)的ADC值，并取腦進(jìn)行組織學(xué)觀察、IgG免疫組化染色半定量觀察血腦屏障(blood-brain barrier，BBB)的通透性。
　　結(jié)果:對(duì)照組DWI及腦組

3、織結(jié)構(gòu)未見異常，IgG染色陰性。與對(duì)照組相比較，創(chuàng)傷組腦損傷區(qū)在1h即出現(xiàn)DWI高信號(hào)，高信號(hào)面積隨時(shí)間延遲逐漸增大，于6h最大，12-24h緩慢增加，與對(duì)照組相比較，各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。ADC值表現(xiàn)為1h升高、6h降低、12h再回升直至24h，與對(duì)照組比較，1h、3h、12h、24h各組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);6小時(shí)組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。組織病理觀察:損傷區(qū)腦組織在1h即出現(xiàn)BBB破壞

4、、紅細(xì)胞從血管內(nèi)漏出、組織間隙增寬，呈現(xiàn)血管源性水腫，并隨時(shí)間延長逐漸加重，以創(chuàng)傷后6h明顯。創(chuàng)傷后3h開始出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)水腫，表現(xiàn)為膠質(zhì)細(xì)胞胞體增大、胞漿淡染或空泡樣變，線粒體腫脹，亦隨時(shí)間延長而逐漸加重，在6h較為明顯。創(chuàng)傷后12h除上述兩種水腫并存之外，開始出現(xiàn)組織壞死、炎性細(xì)胞浸潤及小膠質(zhì)細(xì)胞增生，以24h明顯。IgG從1h開始呈陽性增至6h最強(qiáng)，維持高水平至24h，與對(duì)照組比較每組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)

5、論:以BBB破壞為特征的血管源性水腫是早期創(chuàng)傷性腦水腫的首發(fā)水腫類型，繼后出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)水腫并存的混合性水腫，隨時(shí)間延長兩種水腫逐漸加重。DWI信號(hào)變化與ADC值可反映創(chuàng)傷后腦組織的病理演變過程，當(dāng)ADC值下降，對(duì)應(yīng)的DWI呈高（亮）信號(hào)時(shí)提示細(xì)胞內(nèi)水腫，反之，ADC圖及DWI均呈高信號(hào)時(shí)則代表血管源性水腫。
　　第二部分早期腦創(chuàng)傷非創(chuàng)傷側(cè)組織的擴(kuò)散加權(quán)成像與病理變化
　　目的:探討腦創(chuàng)傷(traumatic brain inj

6、ury，TBI)后非創(chuàng)傷側(cè)腦組織彌散加權(quán)磁共振成像(diffusion-weighted magnetic resonance imaging，DW-MRI)、表觀擴(kuò)散系數(shù)(apparent diffusion coefficient，ADC)與病理變化。
　　方法:選健康成年Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為對(duì)照組和創(chuàng)傷組(TBI)，創(chuàng)傷組按改良Feeney法制作早期腦創(chuàng)傷模型，創(chuàng)傷組按致傷后時(shí)間點(diǎn)再分為5個(gè)亞組—1h、3h、6h

7、、12h、24h，每組10只。對(duì)照組除不撞擊之外其他操作同TBI組。各時(shí)相點(diǎn)分別對(duì)各組進(jìn)行頭部磁共振擴(kuò)散加權(quán)成像DW-MRI檢查，測量鏡像非損創(chuàng)側(cè)腦組織的ADC值，取鏡像非創(chuàng)傷側(cè)腦組織進(jìn)行組織學(xué)觀察、IgG免疫組化染色半定量觀察血腦屏障(blood-brain barrier，BBB)的通透性，所得值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:對(duì)照組的腦組織結(jié)構(gòu)及DW-MRI未見異常，IgG染色陰性。與對(duì)照組相比較，創(chuàng)傷組非創(chuàng)傷側(cè)各時(shí)相點(diǎn)DW-M

8、RI未見異常，ADC值1h基本正常，3h下降，6h升高，12～24h又呈下降趨勢，但各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。組織病理觀察:1h腦組織結(jié)構(gòu)未見異常;3h出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)水腫，表現(xiàn)為膠質(zhì)細(xì)胞胞體增大、胞漿淡染或空泡樣變，線粒體腫脹。6h細(xì)胞內(nèi)水腫加重，同時(shí)出現(xiàn)血管源性水腫，表現(xiàn)為BBB破壞、紅細(xì)胞從血管內(nèi)漏出。12～24h細(xì)胞內(nèi)水腫仍繼續(xù)加重，而血管源性水腫有緩解趨勢，并見小膠質(zhì)細(xì)胞增生。IgG染色在1小時(shí)為陰性，

9、3小時(shí)弱陽性，6小時(shí)強(qiáng)陽性，12～24小時(shí)呈減弱趨勢，與對(duì)照組比較3h、6h、12h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)。
　　結(jié)論:大腦是一個(gè)高級(jí)整合中樞，當(dāng)一側(cè)腦創(chuàng)傷時(shí)，非創(chuàng)傷側(cè)的腦組織有相應(yīng)的病理變化，在時(shí)間上滯后于損傷側(cè)，首先出現(xiàn)的是細(xì)胞內(nèi)水腫，然后發(fā)生血管源性水腫，隨損傷時(shí)間延長血管源性水腫有緩解趨勢，但ADC值無顯著變化，DW-MRI呈現(xiàn)“假性正常”現(xiàn)象。
　　第三部分AQP4在大鼠早期腦創(chuàng)傷組織的表達(dá)與腦水腫的關(guān)系

10、
　　目的:探討大鼠早期腦創(chuàng)傷（traumatic brain injury，TBI）后水通道蛋白-4（aquaporin-4，AQP4）的表達(dá)與腦水腫變化，尤其與血腦屏障結(jié)構(gòu)破壞之間的關(guān)系。
　　方法:健康成年Wistar大鼠120只，制作早期腦創(chuàng)傷模型，數(shù)字表法隨機(jī)分為對(duì)照組和創(chuàng)傷組，創(chuàng)傷組又分:創(chuàng)傷1h組、3h組、6h組、12h組、24 h組5個(gè)亞組，每組各20只，各時(shí)相點(diǎn)取腦分別進(jìn)行腦含水量測定、病理觀察腦水腫情況及

11、BBB結(jié)構(gòu)變化，免疫組織化學(xué)及免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測腦組織IgG和AQP4表達(dá)。
　　結(jié)果:對(duì)照組腦組織結(jié)構(gòu)正常，IgG染色陰性，腦含水量及AQP4表達(dá)未見異常。與對(duì)照組相比較，創(chuàng)傷組的腦含水量從創(chuàng)傷6h后明顯增加，24h最高，與對(duì)照組相比較，6h，12h，24h組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;IgG從創(chuàng)傷1h后即明顯增加至6h，之后維持高水平至24h，與對(duì)照組比較每組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;病理觀察顯示，腦創(chuàng)傷后1h即

12、出現(xiàn)以BBB破壞為特征的血管源性水腫，可見紅細(xì)胞從血管內(nèi)漏出、組織間隙增寬，創(chuàng)傷后3h開始出現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)水腫，表現(xiàn)為膠質(zhì)細(xì)胞包體增大、胞漿淡染或空泡樣變、線粒體腫脹，兩種水腫均隨時(shí)間延長而逐漸加重，在6h較為明顯。創(chuàng)傷后12h除了上述兩種水腫并存之外，開始出現(xiàn)組織壞死、炎性細(xì)胞浸潤及小膠質(zhì)細(xì)胞增生，24h明顯。AQP4蛋白在1h開始降低，6h降至最低點(diǎn)，12h開始回升，呈“V”形變化，與對(duì)照組對(duì)比，3、6、24小時(shí)組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0