流體剪切力對MC3T3-E1細胞OPG、RANKL蛋白表達的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探索流體剪切力(FSS)作用下,兩種調節(jié)骨骼重建的重要分子骨保護素(OPG)和破骨細胞分化因子(ODF)即細胞核因子kB受體活化因子配體(RANKL)的蛋白表達情況,從而揭示流體剪切力對于維持骨組織形成與吸收動態(tài)平衡的特殊作用。
   方法:本研究采用體外模型對MC3T3-E1細胞加載流體剪切力,經(jīng)過不同時長(0min、30min、60min、90min、120min)加力后,對MC3T3-E1細胞分別進行了染色和裂解,然

2、后運用免疫熒光和蛋白印跡法對骨保護素(OPG)和破骨細胞分化因子(RANKL)的蛋白表達水平進行定量分析。
   結果:靜態(tài)培養(yǎng)組RANKL的表達隨時間的延長而增加,OPG的表達則減少,使得OPG與RANKL的比值(OPG/RANKL)不斷下降,促使骨組織向著加速吸收的方向發(fā)展;加載流體剪切力30min后,蛋白檢測發(fā)現(xiàn)FSS促進了OPG蛋白表達且抑制了RANKL蛋白表達,阻滯了OPG/RANKL比值減少的趨勢;加力60min后,

3、發(fā)現(xiàn)FSS進一步促進了OPG的表達,同時RANKL的表達則受到較大抑制,與靜態(tài)組相比此時OPG/RANKL的比值增加了50%左右,使得骨組織向著成骨的方向發(fā)展;在120min內,隨著FSS作用時間的延長OPG/RANKL的比值也在不斷的增加,各組間OPG與RANKL的比值(OPG/RANKL)有顯著的提高。
   結論:成骨細胞對FSS的響應要經(jīng)歷一個短暫的潛伏期,但與其他作用力相比流體剪切力對成骨細胞的作用更加有效;流體剪切力

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