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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?用硅酸三鈣C3S混合磷酸鈣系(α-磷酸三鈣α-TCP+磷酸氫鈣DCPD)制成硅磷酸鈣復(fù)合骨水泥,合理調(diào)節(jié)骨水泥的固化時(shí)間、降解率等理化性質(zhì),評(píng)價(jià)了骨水泥對(duì)體外培養(yǎng)的小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1的毒性影響,并對(duì)相關(guān)基因表達(dá)水平進(jìn)行了研究。
實(shí)驗(yàn)方法:(1)復(fù)合骨水泥的制備:使用機(jī)械混合法制備α-TCP粉末;使用共沉淀法制備C3S粉末,根據(jù)復(fù)合骨水泥的不同配比,添加各種原材料粉末制備復(fù)合骨水泥;將復(fù)合的水泥柱子模擬體液(
2、SBF)中浸泡,記錄不同時(shí)間段所得浸提液的pH值及水泥柱的降解率,研究了不同水泥柱SEM和XRD微觀結(jié)構(gòu)。(2)細(xì)胞水平的檢測(cè):MTT法檢測(cè)骨水泥浸提液對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞的毒性。(3)基因表達(dá)水平的檢測(cè):通過(guò)熒光定量PCR對(duì)細(xì)胞周期的相關(guān)基因細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制物(Cdkn2b)以及成骨細(xì)胞分化標(biāo)志物(COL-Ⅰ)的表達(dá)水平進(jìn)行實(shí)時(shí)定量分析。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)固化時(shí)間:隨著C3S添加比例的增大,固化時(shí)間逐漸變短。未添加
3、C3S的磷酸鈣系骨水泥的固化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。(2)降解率:復(fù)合C3S的骨水泥具有較為適中的降解性,在不添加C3S時(shí),骨水泥的降解率最小,隨著C3S比例的增大,降解率也呈現(xiàn)增大的趨勢(shì);所有配比的復(fù)合骨水泥的降解率均隨時(shí)間延長(zhǎng)而增大,最后趨于穩(wěn)定;隨骨水泥在模擬體液浸泡時(shí)間延長(zhǎng),浸提液的pH值由初期的堿性到最終接近中性。(3)SEM和XRD(∶)SEM和XRD結(jié)果證實(shí)固化后骨水泥表面生成了羥基磷灰石。(4)細(xì)胞毒性:添加合適比例C3S后的復(fù)合骨水
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