低載荷機械振動對小鼠MC3T3-E1細胞增殖及分化的影響.pdf

1、目的:運用低載荷機械振動細胞模型，評價力學載荷作用對小鼠MC3T3-E1細胞生物活性的影響，探討低載荷機械振動作用小鼠MC3T3-E1細胞成骨相關信號分子基因蛋白表達的變化。
　　方法:
　　1研究低載荷機械振動模型對小鼠MC3T3-E1細胞增殖的影響
　　采用35Hz，加速度0.25g的低載荷機械振動裝置，作用于小鼠MC3T3-E1細胞，按每天振動時間，分為A，B，C，D四組，時間分別為0 min，15 min，30

2、 min，60 min，連續(xù)7天。通過光鏡及MTT增殖實驗檢測不同振動條件下小鼠MC3T3-E1細胞增殖的變化情況
　　2研究低載荷機械振動模型對小鼠MC3T3-E1細胞分化能力的影響。
　　按上述分組，應用低載荷機械振動裝置連續(xù)干預14天，通過茜素紅染色及顯微鏡觀察鈣化結節(jié)數目及AIP活性測定，研究不同振動條件對小鼠MC3T3-E1細胞分化能力的影響。
　　3研究低載荷機械振動對小鼠MC3T3-E1細胞成骨相關信號分

3、子基因及蛋白表達的影響
　　按上述分組，連續(xù)干預7天，采用Real-timePCR檢測不同振動條件下成骨相關信號分子基因TGF-β及BMP-2，Runx2的轉錄變化，WesternBlot檢測不同振動條件下成骨相關蛋白TGF-β1、pERK及Runx2的表達水平。
　　結果:
　　1 A、B、C、D組MTT實驗分別為(0.292±0.0254)、(0.553±0.041)、(0.596±0.078)、(0.313±0.

4、037)，與A組對比，B組、C組的成骨細胞增殖變化有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），而D組與A組差異較小（P＞0.05）;
　　2 A、B、C、D組ALP活性測分別為(5.014±0.094)、(7.259±0.314)、(8.529±0.186)、(5.299±0.136)。B組、C組的鈣化結節(jié)數目及ALP活性較A組、D組有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，而D組與A組無明顯統(tǒng)計學差異（P＞0.05）;
　　3 Real-tim

5、ePCR檢測結果提示，B組、C組成骨細胞的TGF-β1、BMP-2、Runx2轉錄水平與A組、D組有統(tǒng)計學差異(P＜0.05），而D組與A組無明顯統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。Western Blot證實B組、C組成骨細胞的低載荷機械振動刺激TGF-β1、pERK及Runx2蛋白表達水平與A組、D組有統(tǒng)計學差異(P＜0.05），而D組與A組無明顯統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　結論:
　　1低載荷機械振動（35Hz，加速度0