IGF-1對MC3T3-E1細胞增殖、凋亡及凋亡調控蛋白Bax、BCL-2表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的： 1、研究不同濃度IGF-1對MC3T3-E1細胞增殖的影響。 2、研究不同濃度IGF-1對MC3T3-E1細胞凋亡及凋亡調控蛋白Bax、BCL-2表達的影響。 方法： 1、小鼠前成骨樣細胞株MC3T3-E1傳代培養(yǎng)。 2、MC3T3-E1細胞分組培養(yǎng),應用4個濃度的IGF-1(1、10、30、50ng/ml)干預24小時,觀察各組別MC3T3-E1細胞動態(tài)生長狀況： 正常血清對照組

2、：細胞用含10％胎牛血清的DMEM液培養(yǎng)；無血清對照組：用不含胎牛血清的DMEM液培養(yǎng)；IGF-1組：用無血清的DMEM液培養(yǎng),倒置相差顯微鏡下觀察,待細胞融合至40-50％,加入相應濃度進行干預。 3、,采用四唑鹽比色法(MTT法)檢測細胞增殖能力；流式細胞技術檢測細胞凋亡率,并分析細胞增殖周期；免疫細胞化學法檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達水平。 4、統(tǒng)計學處理： 計量資料以均數(shù)±標準差(-x±s)表示,

3、在Windows XP操作系統(tǒng)上采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行分析,各組間比較采用單因素方差分析(One-way ANOVE),多個樣本均數(shù)間的多重比較采用LSD-t檢驗；并對Bax/Bcl-2蛋白表達強度比與細胞凋亡率之間作Pearson等級相關秩檢驗。P<0.05為有顯著性差異,有統(tǒng)計學意義。 結論： 1、無血清培養(yǎng)抑制MC3T3-E1細胞增殖,促進其凋亡。 2、一定濃度的IGF-1能改善無血清引起的成骨抑

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