IGF-1對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞增殖、凋亡及凋亡調(diào)控蛋白Bax、BCL-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 1、研究不同濃度IGF-1對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞增殖的影響。 2、研究不同濃度IGF-1對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞凋亡及凋亡調(diào)控蛋白Bax、BCL-2表達(dá)的影響。 方法： 1、小鼠前成骨樣細(xì)胞株MC3T3-E1傳代培養(yǎng)。 2、MC3T3-E1細(xì)胞分組培養(yǎng),應(yīng)用4個(gè)濃度的IGF-1(1、10、30、50ng/ml)干預(yù)24小時(shí),觀察各組別MC3T3-E1細(xì)胞動(dòng)態(tài)生長狀況： 正常血清對(duì)照組

2、：細(xì)胞用含10％胎牛血清的DMEM液培養(yǎng)；無血清對(duì)照組：用不含胎牛血清的DMEM液培養(yǎng)；IGF-1組：用無血清的DMEM液培養(yǎng),倒置相差顯微鏡下觀察,待細(xì)胞融合至40-50％,加入相應(yīng)濃度進(jìn)行干預(yù)。 3、,采用四唑鹽比色法(MTT法)檢測細(xì)胞增殖能力；流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率,并分析細(xì)胞增殖周期；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達(dá)水平。 4、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理： 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-x±s)表示,

3、在Windows XP操作系統(tǒng)上采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,各組間比較采用單因素方差分析(One-way ANOVE),多個(gè)樣本均數(shù)間的多重比較采用LSD-t檢驗(yàn)；并對(duì)Bax/Bcl-2蛋白表達(dá)強(qiáng)度比與細(xì)胞凋亡率之間作Pearson等級(jí)相關(guān)秩檢驗(yàn)。P<0.05為有顯著性差異,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 1、無血清培養(yǎng)抑制MC3T3-E1細(xì)胞增殖,促進(jìn)其凋亡。 2、一定濃度的IGF-1能改善無血清引起的成骨抑