黃瓜倍性材料的創(chuàng)制與鑒定.pdf

1、黃瓜（Cucumis sativus L.，2n=14）遺傳基礎(chǔ)狹窄，種質(zhì)資源多樣性較為有限，遺傳育種研究相對(duì)落后，倍性育種越來越受到重視。通過篩選不同倍性（整倍體和非整倍體）種質(zhì)材料，可以促進(jìn)黃瓜的分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)的研究。同時(shí)，通過單倍體培養(yǎng)技術(shù)可以快速獲得純系（單倍體或雙單倍體），從而加快黃瓜的育種進(jìn)程。
　　本論文利用不同基因型黃瓜材料，一方面以秋水仙素為誘導(dǎo)劑，處理黃瓜萌動(dòng)種子，研究獲得染色體數(shù)目加倍的植株;另一方面

2、以未授粉子房培養(yǎng)和游離小孢子培養(yǎng)為試驗(yàn)方法，觀察外植體在培養(yǎng)過程中的發(fā)育情況，初步研究影響單倍體誘導(dǎo)的主要因素。
　　1.黃瓜倍性材料的誘導(dǎo)與鑒定
　　通過0.4％秋水仙素溶液處理黃瓜萌動(dòng)種子，誘導(dǎo)獲得8株四倍體(2n=28)，3株非整倍體(2n=16，19，27)材料。將四倍體與二倍體雜交獲得了三倍體材料(2n=21)。經(jīng)熒光原位雜交分析，進(jìn)一步驗(yàn)證創(chuàng)制出的整倍性材料為三倍體與四倍體。不同倍性植株的形態(tài)學(xué)和葉片氣孔特征存在

3、一定差異，說明形態(tài)學(xué)篩選和葉片氣孔電鏡觀察可以作為黃瓜倍性鑒定的輔助方法。對(duì)染色體數(shù)目為16的一株非整倍體誘導(dǎo)株進(jìn)行染色體組成鑒定，明確該材料為附加兩條1號(hào)染色體的四體材料(2n=14+2)。研究表明秋水仙素不僅可直接誘導(dǎo)出同源多倍體，同時(shí)可誘導(dǎo)出各種非整倍體。
　　2.黃瓜未授粉子房培養(yǎng)技術(shù)體系的優(yōu)化
　　以2份基因型黃瓜‘P02×L8’、‘P02×白玉’為試驗(yàn)材料，研究了取材時(shí)間、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間和外源添加物對(duì)黃瓜未授粉子房培

4、養(yǎng)的影響。結(jié)果表明:選取開花前0-2 d的未授粉子房為外植體培養(yǎng)效果最好;高溫預(yù)培養(yǎng)與外源添加物可有效促進(jìn)黃瓜未授粉子房的離體培養(yǎng)，MS+0.04 mg/L TDZ+20 mg/L AgNO3的培養(yǎng)基，35℃暗培養(yǎng)3d可啟動(dòng)離體雌核發(fā)育途徑。
　　3.黃瓜游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)體系的優(yōu)化
　　以30份基因型黃瓜為試驗(yàn)材料，研究了游離小孢子發(fā)育時(shí)期與花蕾形態(tài)特征的相關(guān)性，以及外植體消毒方法、基因型和激素組合對(duì)黃瓜游離小孢子培養(yǎng)的影