基于HPLC-MS技術(shù)的山楂多元酚類物質(zhì)的質(zhì)量控制.pdf

1、山楂是常用的中草藥之一,其主要功效是消食健胃,行氣散瘀,山楂中富含黃酮類和酚酸類等多酚類成分,本文利用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)建立了定性定量分析山楂中多酚類成分的方法,并將該方法應(yīng)用于評(píng)價(jià)不同來(lái)源生山楂的一致性和不同炮制品中的成分差異,主要研究工作如下:
　　 1.建立了UV法測(cè)定總黃酮含量的方法,經(jīng)方法學(xué)考察證實(shí)該方法的線性范圍、穩(wěn)定性、精密度和加樣回收率均符合要求；利用響應(yīng)面法(RSM)得到超聲提取山楂中總黃酮的最優(yōu)提取條

2、件,即乙醇濃度66.3％,提取時(shí)間47min,液固比70mL／g,總黃酮含量達(dá)到75.87mg／g,經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證,該結(jié)果與模擬結(jié)果的誤差為0.34％,符合要求。
　　 2.建立了同時(shí)定性分析12種多元酚類成分的HPLC-ESI-IT／MS／MS方法,即選用Waters Atlantis-T3(4.6mm×250mm,5μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-0.1％甲酸乙腈溶液(B)為流動(dòng)相(1.0mL·min-1)梯度洗脫,根據(jù)質(zhì)譜

3、所提供的多重信息以及有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)其中12個(gè)色譜峰進(jìn)行了成分歸屬,分別為:檸檬酸、綠原酸、花青素B2、表兒茶素、花青素B3、蘆丁葡萄糖苷、牡荊素葡萄糖苷、山楂酸、牡荊素鼠李糖苷、蘆丁、異槲皮苷和金絲桃苷。
　　 3.建立了內(nèi)標(biāo)法定量分析其中7種成分的HPLC-ESI-IT／MS方法,質(zhì)譜條件中加入源內(nèi)誘導(dǎo)解離電壓(SCID),并采用選擇離子監(jiān)測(cè)(SIM)掃描,選用大豆苷元為內(nèi)標(biāo)物進(jìn)行定量,經(jīng)方法學(xué)考察證實(shí)該方法最低檢測(cè)限達(dá)到13

4、pg／mL；日內(nèi)精密度中,保留時(shí)間(tR)和相對(duì)峰面積(RPA)的RSD值分別為0.47～3.65％和1.28～6.03％；日間精密度中,tR和RPA的RSD值分別為0.36～3.09％和0.16～6.17％;平均加樣回收率在84.03～101.14％之間。
　　 4.利用建立的HPLC-ESI-IT／MS定量分析方法測(cè)定10批不同來(lái)源生山楂和不同山楂炮制品中7種多元酚類成分的含量。結(jié)果顯示,7種成分中,檸檬酸含量最多,金絲桃苷