黃精皂苷對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠5-HT1AR介導(dǎo)的β-arrestin2-akt信號(hào)通路的影響及其可能機(jī)制.pdf

1、抑郁癥是以持續(xù)的心情低落為主要臨床特征的情緒障礙性疾病。黃精皂苷(Saponins of Rhizoma Polygonati, SRP)是中藥黃精中的主要有效成分,本課題組以往研究發(fā)現(xiàn),SRP能夠顯著改善抑郁模型小鼠行為學(xué),提高慢性應(yīng)激抑郁小鼠腦內(nèi)及血清中5-羥色胺、多巴胺、去甲腎上腺素的含量。β-arrestin2對(duì)絕大部分G蛋白偶聯(lián)受體(G protein coupled receptor, GPCR)介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路具有調(diào)節(jié)作

2、用。越來越多的研究表明,除了調(diào)節(jié) GPCR信號(hào)通路以外,β-arrestin2作為調(diào)節(jié)分子也在其他多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)在以往研究基礎(chǔ)上,采用慢性不可預(yù)知刺激誘導(dǎo)的應(yīng)激大鼠模型,從整體水平考察了大鼠大腦皮層中5-羥色胺1A受體(5-hydroxy tryptamine1A receptor,5-HT1AR)、β-arrestin2、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(akt)表達(dá)水平的變化,進(jìn)一步探討其在慢性不可預(yù)知應(yīng)激大鼠的作用

3、及相關(guān)機(jī)制,同時(shí)觀察SRP對(duì)大鼠大腦皮層中5-HT1AR表達(dá)的影響。
　　目的:
　　1.通過對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠行為學(xué)的觀察,進(jìn)一步明確SRP的抗抑郁作用及其特點(diǎn)。
　　2.通過對(duì)慢性應(yīng)應(yīng)激抑郁大鼠大腦皮層5-HT1AR、β-arrestin2、akt表達(dá)的研究,探討SRP的抗抑郁作用及其可能機(jī)制。
　　方法:
　　SD大鼠60只,隨機(jī)分為6組:正常組、模型組、SRP(400、200、100 mg/kg)組

4、和氟西汀(2 mg/kg)組。從第1天開始,每天一次連續(xù)灌胃28天,正常組、模型組每天灌服等體積的羧甲基纖維素鈉溶液,其他各組分別按照已設(shè)置劑量灌服SRP、氟西汀。
　　分別稱取各組大鼠在實(shí)驗(yàn)第1、7、14、21、28天的體重,實(shí)驗(yàn)第7、14、21、28天體重減去實(shí)驗(yàn)第1天體重為各組大鼠的體重增長值;通過大鼠自主活動(dòng)程序儀、測(cè)定大鼠自主活動(dòng)次數(shù),觀察大鼠行為學(xué)指標(biāo)變化;采用免疫組化法測(cè)定大鼠大腦皮層5-HT1AR蛋白表達(dá)水平;采用

5、 Western blot法測(cè)定大鼠大腦皮層5-HT1AR、β-arrestin2、akt蛋白的表達(dá)含量。
　　結(jié)果:
　　1.SRP對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠體重的影響
　　實(shí)驗(yàn)第1天,各組大鼠體重比較差異無顯著性。從實(shí)驗(yàn)第14天開始,與正常組比較,模型組大鼠體重增長值明顯減小,且差異有顯著性(P<0.01, P<0.01);與模型組大鼠比較,氟西汀組,SRP(400、200、100mg/kg)組大鼠體重增長值均有增加,且差

6、異有顯著性(P<0.01)。
　　2.SRP對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠行為學(xué)的影響
　　實(shí)驗(yàn)的第1天,各組大鼠自主活動(dòng)次數(shù)之間差異無顯著性。實(shí)驗(yàn)的第28天,與正常組比較,模型組大鼠自主活動(dòng)次數(shù)明顯減少,且差異有顯著性(P<0.01);與模型組比較,SRP(400、200mg/kg),氟西汀組大鼠自主活動(dòng)次數(shù)明顯增加,差異有顯著性(P<0.01)。
　　3.SRP對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠大腦皮層5-HT1AR表達(dá)的影響
　　由圖

7、像分析所得平均光密度值可知,與正常組比較,模型組大鼠大腦額葉皮質(zhì)中5-HT1AR表達(dá)降低(P<0.01); SRP(400、200 mg/kg)及Flu(2 mg/kg)干預(yù)后,大腦皮層5-HT1AR的表達(dá)較模型組均有明顯的增加(P<0.01)。
　　4.SRP對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠大腦皮層5-HT1AR、β-arrestin2、akt表達(dá)的影響
　　對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行定量分析,計(jì)算各實(shí)驗(yàn)組5-HT1AR、β-arrestin2、a

8、kt與β-actin的比值,并以正常對(duì)照組為基數(shù)1,計(jì)算各實(shí)驗(yàn)組比值與正常組的相對(duì)比例。結(jié)果顯示,相對(duì)于正常組,模型組大鼠大腦皮層組織中的5-HT1AR表達(dá)明顯降低(P<0.01),β-arrestin2、akt明顯升高(P<0.05),而SRP各劑量組可顯著逆轉(zhuǎn)這種趨勢(shì)(P<0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.SRP可以改善慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠的抑郁行為表現(xiàn),如體重增長降低、自主活動(dòng)次數(shù)減少等,表明SRP具有改善抑郁癥狀的作