GDM孕婦外周血單個核細胞在LPS刺激下TLR4的表達及其介導的NF-κB信號通路在GDM發(fā)病中的研究.pdf

1、目的:妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus,GDM)是產(chǎn)科常見病,其合并癥與并發(fā)癥多,嚴重危及母兒健康。胰島素抵抗(Insulin Resistance,IR)是妊娠期糖尿病與2型糖尿病共同的病理生理基礎(chǔ),胰島素抵抗依賴于TLR4和NF-кB的活化反應?；A(chǔ)醫(yī)學研究中發(fā)現(xiàn)LPS—TLR4—Nf-κB通路能介導大量釋放炎癥因子,是一個較為經(jīng)典的炎癥通路。本試驗在體外用內(nèi)毒素刺激,建立這樣的炎癥通路,觀察

2、LPS—TLR4—Nf-κB通路在妊娠期糖尿病、正常孕婦以及育齡期婦女外周血單個核細胞中的作用,比較TLR4及NF-κB mRNA在三組中的表達是否有差異,以及三組單個核細胞培養(yǎng)液中炎癥因子(IL-1、IL-10、TNF-a)的釋放水平,探討LPS—TLR4—Nf-κB通路介導的炎癥因子釋放在GDM發(fā)病中作用。
　　方法:實驗研究對象的納入:新診斷妊娠期糖尿病孕婦(依據(jù)我國妊娠合并糖尿病臨床診斷與治療推薦指南)、正常孕婦以及育齡期

3、婦女各20例,存在胎膜早破、先兆早產(chǎn)以及合并其它潛在的炎癥者均不納入本次研究的范圍。體外模擬炎癥:抽取外周靜脈血5ml,分離出單個核細胞,用內(nèi)毒素(lipopolysaccharide,LPS)體外刺激并培養(yǎng)細胞觀察LPS—TLR4—Nf-κB通路在GDM患者主要環(huán)節(jié)標志物表達,RT-PCR(reverse transcription PCR)法檢測TLR4(toll like recepter4)及核因子κB(Nf-κB)mRNA的表

4、達。炎癥因子的測定:ELISA法檢測培養(yǎng)液中IL-1、IL-10、TNF-a水平。
　　結(jié)果:GDM組與正常孕婦組及育齡期婦女組TLR4、Nf-κB mRNA表達存在差異(p=0.000),差異有統(tǒng)計學意義。GDM組及正常孕婦組TLR4與Nf-κB mRNA表達水平存在相關(guān)性(rGDM=0.768,r正常孕婦=0.833),且相關(guān)性良好。育齡期婦女組TLR4與Nf-κB mRNA表達水平也存在相關(guān)性(r育齡期婦女=0.719),相

5、關(guān)性稍差。GDM組IL-1、IL-10以及TNF-α表達水平分別為:66.15±1.66、43.32±0.87及4.71±0.27,正常孕婦組IL-1、IL-10以及TNF-α表達水平分別為:14.88±0.80、12.49±0.28及0.89±0.39,正常育齡期婦女組IL-1、IL-10以及TNF-α表達水平分別為3.58±0.22、P25=0.90;P75=1.79及0.26±0.02。
　　結(jié)論:GDM患者外周血單個核細胞