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文檔簡介
1、目的:觀察間斷性缺氧(intermittenthypoxia,IH)對小鼠海馬tau蛋白磷酸化水平及相關(guān)酶表達的影響。
方法:選取雄性8周齡昆明小鼠30只,隨機分為對照組(n=5)和IH組(n=25)。對照組置于對照箱內(nèi)不給予IH處理,8小時后取腦組織待測。IH組置于間斷性缺氧箱內(nèi)給予IH處理8小時,分別于IH后1h、6h、12h、24h及48h取腦組織待測。HE染色觀察海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)變化,免疫組化法觀察海馬區(qū)總tau蛋白(
2、T-tau)、磷酸化tau蛋白(P-tau)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)及磷酸化P38絲裂原活化蛋白激酶(P-P38MAPK)的表達,檢測各蛋白陽性表達的平均光密度值(OD值)。
結(jié)果:
1、HE結(jié)果顯示:IH后可見細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞數(shù)目減少、排列疏松,隨著時間的延長部分細(xì)胞呈萎縮狀、染色質(zhì)顆粒欠清晰,部分細(xì)胞出現(xiàn)胞漿減少、胞核固縮,濃染。
2、免疫組化結(jié)果顯示:(1)各組間T-tau表達差異無統(tǒng)計
3、學(xué)意義;(2)IH后1h、6h、12h、24h及48hP-tau的平均OD值分別為0.104±0.008、0.125±0.015、0.137±0.013、0.159±0.021及0.128±0.020,除IH后1h外其余各組均高于對照組(0.104±0.008,P<0.05);24h組高于其他各組(P<0.05);P-tau陽性表達在IH后隨著時間的延長發(fā)生變化,其平均OD值在IH后6h開始增加,IH后24h達到高峰后下降,于IH后48
4、h仍然高于正常對照組。(3)IH后1h、6h、12h、24h及48hGSK-3β的平均OD值分別為0.089±0.011、0.108±0.018、0.119±0.014、0.137±0.019及0.109±0.016,除IH后1h外其余各組均高于對照組(0.079±0.009,P<0.05);24h組高于除IH后12h外的其余各組(P<0.05);GSK-3β的平均OD值在IH后6h開始增加,IH后24h進一步升高后下降,于IH后48h
5、仍然高于正常對照組。(4)IH后1h、6h、12h、24h及48hP-P38MAPK的平均OD值分別為0.112±0.015、0.133±0.014、0.153±0.020、0.124±0.015及0.112±0.017,IH后各組P-P38MAPK的陽性表達均高于對照組(0.091±0.009,P<0.05);12h組高于其他各組(P<0.05),P-P38MAPK的陽性表達在IH后1h開始增加,于IH后12h其陽性表達達到高峰,到4
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