間斷性缺氧對(duì)小鼠海馬tau蛋白磷酸化的動(dòng)態(tài)影響.pdf

1、目的:觀察間斷性缺氧(intermittenthypoxia,IH)對(duì)小鼠海馬tau蛋白磷酸化水平及相關(guān)酶表達(dá)的影響。
　　方法:選取雄性8周齡昆明小鼠30只,隨機(jī)分為對(duì)照組(n=5)和IH組(n=25)。對(duì)照組置于對(duì)照箱內(nèi)不給予IH處理,8小時(shí)后取腦組織待測(cè)。IH組置于間斷性缺氧箱內(nèi)給予IH處理8小時(shí),分別于IH后1h、6h、12h、24h及48h取腦組織待測(cè)。HE染色觀察海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)變化,免疫組化法觀察海馬區(qū)總tau蛋白(

2、T-tau)、磷酸化tau蛋白(P-tau)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)及磷酸化P38絲裂原活化蛋白激酶(P-P38MAPK)的表達(dá),檢測(cè)各蛋白陽(yáng)性表達(dá)的平均光密度值(OD值)。
　　結(jié)果:
　　1、HE結(jié)果顯示:IH后可見(jiàn)細(xì)胞間隙增寬,細(xì)胞數(shù)目減少、排列疏松,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)部分細(xì)胞呈萎縮狀、染色質(zhì)顆粒欠清晰,部分細(xì)胞出現(xiàn)胞漿減少、胞核固縮,濃染。
　　2、免疫組化結(jié)果顯示:(1)各組間T-tau表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)

3、學(xué)意義;(2)IH后1h、6h、12h、24h及48hP-tau的平均OD值分別為0.104±0.008、0.125±0.015、0.137±0.013、0.159±0.021及0.128±0.020,除IH后1h外其余各組均高于對(duì)照組(0.104±0.008,P<0.05);24h組高于其他各組(P<0.05);P-tau陽(yáng)性表達(dá)在IH后隨著時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生變化,其平均OD值在IH后6h開(kāi)始增加,IH后24h達(dá)到高峰后下降,于IH后48

4、h仍然高于正常對(duì)照組。(3)IH后1h、6h、12h、24h及48hGSK-3β的平均OD值分別為0.089±0.011、0.108±0.018、0.119±0.014、0.137±0.019及0.109±0.016,除IH后1h外其余各組均高于對(duì)照組(0.079±0.009,P<0.05);24h組高于除IH后12h外的其余各組(P<0.05);GSK-3β的平均OD值在IH后6h開(kāi)始增加,IH后24h進(jìn)一步升高后下降,于IH后48h

5、仍然高于正常對(duì)照組。(4)IH后1h、6h、12h、24h及48hP-P38MAPK的平均OD值分別為0.112±0.015、0.133±0.014、0.153±0.020、0.124±0.015及0.112±0.017,IH后各組P-P38MAPK的陽(yáng)性表達(dá)均高于對(duì)照組(0.091±0.009,P<0.05);12h組高于其他各組(P<0.05),P-P38MAPK的陽(yáng)性表達(dá)在IH后1h開(kāi)始增加,于IH后12h其陽(yáng)性表達(dá)達(dá)到高峰,到4