2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、抗生素在大腸桿菌病預(yù)防及治療方面有著不可替代的作用,但是隨著抗生素的不恰當(dāng)使用,由耐藥菌株引起的人及動(dòng)物感染性疾病不斷增加,大腸桿菌耐藥及多重耐藥現(xiàn)象已十分嚴(yán)重。 為檢測大腸桿菌的耐藥水平,為大腸桿菌耐藥基因檢測芯片的研制提供陽性樣本,解決大腸桿菌耐藥性快速檢測問題,我們從吉林省長春、通化、白城、梅河、延邊和四平采集的疑似大腸桿菌病致死的雞源、豬源、犬源和貓?jiān)床×蠘颖?6份。對(duì)采集樣本進(jìn)行分離、鑒定,獲得大腸桿菌62株。

2、 采用平皿二倍稀釋法對(duì)隨機(jī)選取的20株大腸桿菌進(jìn)行了針對(duì)諾氟沙星、慶大霉素、復(fù)方新諾明、強(qiáng)力霉素、氟苯尼考五種代表性藥物的耐藥性檢測。受檢大腸桿菌對(duì)喹諾酮類藥物均耐藥,其中高度耐藥菌株6株;對(duì)氨基糖苷類藥物耐藥菌株19株,其中高度耐藥菌株12株;對(duì)磺胺類藥物耐藥菌株20株,全部表現(xiàn)為高度耐藥;對(duì)四環(huán)素類藥物耐藥菌株14株,其中高度耐藥菌株11株;對(duì)氯霉素類藥物耐藥菌株l株。其中,對(duì)3種抗菌藥物耐藥的大腸桿菌為5株,占受檢菌株的25%;對(duì)

3、4種抗菌藥物耐藥的大腸桿菌為13株,占受檢菌株的65%;對(duì)5種抗菌藥物耐藥的大腸桿菌為1株,占受檢菌株的5%。監(jiān)測結(jié)果表明,當(dāng)前大腸桿菌耐藥特點(diǎn)表現(xiàn)為高度耐藥、多重交叉耐藥。 針對(duì)大腸桿菌主要耐藥性基因GyrA、GyrB、ParC、AacC4、Sul2和TetA設(shè)計(jì)相應(yīng)的特異性引物,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行克隆和測序,應(yīng)用Clustalxl.83軟件、MEGA3.1軟件對(duì)測得序列分析。大腸桿菌5號(hào)菌株GyrA基因83位

4、Ser突變?yōu)長eu,87位Asp突變?yōu)锳sn;其ParC基因80 Ser位突變?yōu)镮le;NCBI-BLAST檢索,PCR擴(kuò)增片段與大腸桿菌同源性達(dá)98%以上;表明5號(hào)菌株GyrA基因可為大腸桿菌對(duì)喹諾酮類耐藥基因檢測芯片所用陽性樣本的制備提供參考。大腸桿菌078<'R>號(hào)菌株攜帶的AacC4基因,9號(hào)菌株、14號(hào)菌株、JX<'11>號(hào)菌株攜帶的Sul2基因和E<,1>R號(hào)菌株攜帶的TetA基因,分別可為制備大腸桿菌對(duì)氨基糖苷類藥物、磺胺

5、類藥物和四環(huán)素類藥物耐藥基因檢測芯片提供陽性樣本。 對(duì)臨床分離大腸桿菌耐藥基因的序列分析結(jié)果還表明,大腸桿菌對(duì)喹諾酮類藥物高度耐藥的078<'R>號(hào)菌株GyrA基因的83位氨基酸發(fā)生突變、104位Asp被Gly取代、181位Asn被Asp取代,但87位氨基酸未發(fā)生突變;大腸桿菌對(duì)喹諾酮類藥物低度耐藥的8號(hào)菌株GyrA基因只發(fā)生一個(gè)氨基酸突變時(shí),ParC基因也發(fā)生突變(80Ser→Ile);上述兩種耐藥基因的突變特點(diǎn)未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)

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