哈爾濱地區(qū)豬源致病性大腸桿菌耐藥性分析及基因分型研究.pdf

1、大腸桿菌病是獸醫(yī)臨床上常見的疾病之一，在養(yǎng)豬業(yè)中其主要危害包括仔豬黃痢、仔豬白痢和豬水腫病等，造成了巨大的損失。隨著抗菌藥物在畜牧業(yè)中的廣泛及不規(guī)范使用，細菌的耐藥性特別是多重耐藥性問題日趨嚴重。
　　 與發(fā)達國家相比，我國大腸桿菌的耐藥形式更為嚴峻，國內圍繞大腸桿菌耐藥性也做了不少研究，但多數(shù)停留在耐藥性和耐藥基因的檢測上，對致病性大腸桿菌質粒的分析及不同地區(qū)致病性大腸桿菌的遺傳相關性缺乏深入的、全面的認識。哈爾濱地區(qū)豬源致病

2、性多重耐藥大腸桿菌的流行、危害以及不同地區(qū)多重耐藥性大腸桿菌的遺傳相關性未見相關報道。
　　 本試驗依據(jù)CLSI(2007)推薦的紙片擴散法檢測了48株分離自規(guī)模化養(yǎng)豬場的致病性大腸桿菌對14種常用抗菌藥物的耐藥性，分析比較致病性大腸桿菌對各種抗菌藥物的多重耐藥情況和耐藥率。試驗結果表明:48株致病性大腸桿菌均表現(xiàn)為多重耐藥;多重耐藥菌株主要表現(xiàn)為3～12耐，對復方新諾明、氟苯尼考的耐藥率高達89％以上，對多西環(huán)素、鏈霉素、鏈霉

3、素、氯霉素、恩諾沙星、慶大霉素、阿莫西林/克拉維酸的耐藥率都超過了50％，對阿米卡星、磷霉素、多粘菌素B相對敏感，磷霉素和多粘菌素B的耐藥率僅僅只有2.1％和0。
　　 對48株大腸桿菌菌株進行了質粒圖譜分析，通過堿式裂解法小量提取質粒，然后對質粒進行了瓊脂糖凝膠電泳分析，并用HindⅢ限制性內切酶對質粒進行了酶切分析。結果表明:質粒獲得率為100％，來源相同的菌株具有相同或相似的質粒圖譜，具有一定的遺傳相關性，而來源不同的菌株

4、的質粒圖譜一般不同，屬于不同克隆。
　　 采用脈沖場凝膠電泳(PFGE)對48株豬源致病性多重耐藥大腸桿菌進行分型研究，并將其結果與耐藥表型和質粒圖譜結果相比較。結果表明:48株大腸桿菌共可分為18個PFGE型別，大多數(shù)型別又可分為不同亞型。同一養(yǎng)殖場不同耐藥表型的菌株和質粒圖譜的菌株都存在PFGE圖譜完全相同的現(xiàn)象，通過對質粒圖譜和脈沖場凝膠電泳圖譜的結果分析可以發(fā)現(xiàn):分離自哈爾濱周邊地區(qū)同一發(fā)病養(yǎng)豬場的大腸桿菌具有一定的遺傳