雞法氏囊中B淋巴細胞的發(fā)育及其免疫功能發(fā)生的研究.pdf

1、對于現代化養(yǎng)雞業(yè)來說，疾病防治是成功的關鍵所在，而疾病的預防又需要我們了解雞自身的免疫狀態(tài)和機制。研究免疫器官的發(fā)育和免疫功能的發(fā)生，可以使我們了解到雞不同時期的免疫狀態(tài)和免疫機制，為適時免疫提供參考依據，從而達到疾病防治的目的。 本實驗分別選擇了13、15、18、20日齡雞胚及1、7、21、35日齡雛雞，每個時期取5只雞的法氏囊，制作冰凍切片，分別進行HE染色和免疫組化染色；同時在胚胎20日齡以后的各時期另取5只雞胚或雛雞的法

2、氏囊，分離淋巴細胞，進行淋巴細胞轉化實驗。 本研究觀察了從雞胚到出殼后的不同生長發(fā)育階段法氏囊的組織結構，結果表明：胚胎13日齡時，法氏囊開始發(fā)育，粘膜上皮下形成結節(jié)狀細胞集團；胚胎15日齡，聚集的細胞集團形成初始的淋巴濾泡；胚胎18日齡到出殼后1日齡，濾泡內淋巴細胞數量增多，多數濾泡髓質和皮質界限仍不明顯；7日齡雛雞法氏囊髓質皮質分界清晰，濾泡數量顯著增多；21日齡到35日齡，濾泡由多邊形逐漸轉變成長方形；在35日齡時，粘膜上

3、皮細胞逐漸增多，排列緊密，細胞核緊密排列成直線位于基底部。從而得出，直至出殼前雞胚法氏囊尚未形成較完整的，能組織起有效體液免疫促進作用的組織基礎結構，其完善的形態(tài)結構需在后天環(huán)境中分化和發(fā)育。 利用免疫組織化學法研究了IgM、IgG和IgA三種B細胞在法氏囊內的出現、組織定位及分布變化規(guī)律。結果顯示，IgM<'+>和IgG<'+>兩種B細胞都是最早出現在胚胎13日齡，分別在粘膜上皮內首先檢測到；胚胎15日齡，IgM<'+>和Ig

4、G<'+>兩種B細胞數量均顯著增多(P<0.05)，且IgM<'+>細胞顯著多于IgG<'+>細胞，IgM<'+>和IgG<'+>細胞都聚集到粘膜上皮下形成陽性細胞集團，外周包裹扁平上皮，形成淋巴濾泡；胚胎18日齡，在粘膜上皮內初次檢測到IgA<'+>B細胞，說明法氏囊內IgA<'+>B細胞出現最晚，此時濾泡內細胞更加密集，IgM<'+>和IgG<'+>兩種B細胞繼續(xù)增加，IgG<'+>細胞數量增加更為明顯，IgG<'+>細胞明顯比Ig

5、M<'+>細胞多；胚胎20日齡至出殼后1日齡，IgM<'+>、IgG<'+>、IgA<'+>三種B細胞數量增加不顯著，IgG<'+>細胞數量明顯多于其他兩種陽性細胞，個別濾泡髓質和皮質初始形態(tài)可確定，單個淋巴濾泡的平均面積無明顯變化；7日齡IgG<'+>細胞數量仍然比IgM<'+>細胞多，IgA<'+>細胞數量驟然增加，此時陽性細胞多分布于濾泡髓質內，濾泡間小梁周圍也分布少數IgA<'+>細胞，單個淋巴濾泡平均面積顯著增加(P<0.05

6、)；21日齡時，IgM<'+>、IgG<'+>和IgA<'+>三種細胞數量繼續(xù)不斷增加，IgG<'+>細胞數量達到峰值，其數量顯著高于IgM<'+>和IgA<'+>細胞；35日齡時，IgM<'+>和IgA<'+>細胞數量繼續(xù)增加，而IgG<'+>細胞數量稍有下降，但顯著高于同日齡其他兩種陽性細胞。可見，從胚胎20日齡直到出殼后35日齡，三種陽性細胞的整體變化趨勢是不斷增加的，隨著日齡的不斷增長，淋巴濾泡的面積也逐漸增大。這些表明了胚胎期

7、和出殼早期雛雞的IgM<'+>、IgG<'+>和IgA<'+>B淋巴細胞是如何不斷分化發(fā)育的。 B細胞增殖反應檢測結果發(fā)現，出殼后4日齡以前，法氏囊內B細胞對有絲分裂原PMA的刺激幾乎無增殖反應；4日齡時，B細胞開始對PMA刺激發(fā)生增殖反應，此時B細胞自身也開始增殖，到10日齡達到峰值；4日齡至21日齡，B細胞對PMA刺激指數持續(xù)增大。說明隨著日齡增長，B細胞免疫功能逐漸增強。 本實驗揭示了免疫器官法氏囊的組織結構發(fā)育、B淋巴細