雞脾臟白髓結(jié)構(gòu)特征及其淋巴細(xì)胞歸巢的初步研究.pdf

1、雞作為我國傳統(tǒng)養(yǎng)殖的家禽，已經(jīng)有數(shù)千年歷史。隨著飼養(yǎng)的進(jìn)步和社會需求增大，密集化養(yǎng)殖的優(yōu)點日益突出，但與此同時引起雞發(fā)病率上升的問題也不容忽視。脾臟作為雞內(nèi)體最大的外周免疫器官，相關(guān)的研究較少。本文在研究雞脾臟白髓的結(jié)構(gòu)特征的基礎(chǔ)上，分離外周血淋巴細(xì)胞并用熒光素羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(CFSE)對其進(jìn)行標(biāo)記。以示蹤其在脾臟中歸巢的過程，探討雞淋巴細(xì)胞在脾臟歸巢的意義，為雞病的防治提供一定的理論依據(jù)。具體研究內(nèi)容和結(jié)果如下:

2、>　　1.雞脾臟白髓的結(jié)構(gòu)特征
　　脾臟作為雞的主要免疫器官之一，其內(nèi)在顯微結(jié)構(gòu)特征的研究具有重要意義。通過觀察雞脾臟橢球及筆毛微動脈的結(jié)構(gòu)特征，探討其與免疫反應(yīng)的相關(guān)聯(lián)系。應(yīng)用光鏡技術(shù)觀察、研究雞脾臟橢球結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)橢球內(nèi)的筆毛微動脈內(nèi)皮為立方高柱狀內(nèi)皮，細(xì)胞連接不緊密，并有淋巴細(xì)胞出現(xiàn)在橢球壁中。推斷橢球中的筆毛微動脈可能是雞淋巴細(xì)胞在脾臟發(fā)生歸巢的場所。
　　2.雞外周血淋巴細(xì)胞的分離及CFSE標(biāo)記
　　隨著研究技

3、術(shù)的改進(jìn)，有關(guān)細(xì)胞體內(nèi)示蹤的方法增多，其中利用CFSE標(biāo)記來進(jìn)行細(xì)胞體內(nèi)示蹤試驗的效果較好。本試驗應(yīng)用梯度離心與CFSE熒光標(biāo)記技術(shù)，對外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記。發(fā)現(xiàn)利用人淋巴分離液可以有效的分離雞外周血淋巴細(xì)胞，CFSE標(biāo)記外周血淋巴細(xì)胞活力良好，形態(tài)正常，熒光顯微鏡下可見大部分被標(biāo)記細(xì)胞發(fā)出綠色熒光，陽性標(biāo)記率高達(dá)98％。說明梯度離心分離外周血淋巴細(xì)胞確實可行，使用熒光染料CFSE進(jìn)行活細(xì)胞體內(nèi)示蹤是一種穩(wěn)定的示蹤方法。