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文檔簡介
1、目的: 探討異基因造血干細(xì)胞移植預(yù)處理因素——清髓照射后供者來源內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)歸巢的情況。
方法: 取6-8周齡C57BL/6(H-2Kb)雄性小鼠骨髓細(xì)胞,密度梯度離心法獲取單個核細(xì)胞,差速貼壁法獲取貼壁細(xì)胞,行EGM-2中加入25μgVEGF的培養(yǎng)體系培養(yǎng),5~7d后,流式細(xì)胞術(shù)及Dil-Ac-LDL和FITC-UEA-1雙染鑒定。8.5Gy清髓照射BALB/C(H-2Kd)小鼠后,普通光學(xué)顯微鏡及透射電子顯微鏡
2、下觀察小鼠脛骨和股骨組織結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)變化。清髓照射BALB/C小鼠后,尾靜脈輸注CFSE標(biāo)記EPC,不同時間點(diǎn)檢測CFSE陽性細(xì)胞在外周血、脾臟和骨髓中的細(xì)胞比例及在肝、脾、小腸中組織分布。
結(jié)果: 采用上述培養(yǎng)方法培養(yǎng)的細(xì)胞,7d時細(xì)胞呈短棒狀;Dil-Ac-LDL和FITC-UEA-1雙陽性;該細(xì)胞CD31+CD133+CD45low/-;培養(yǎng)至15d時,可見細(xì)胞呈管狀分布。清髓照射小鼠,照射后第3d,髓內(nèi)大量出血;
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