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文檔簡(jiǎn)介
1、本試驗(yàn)以牡丹品種‘胡紅’為試材,采用PCR和RACE技術(shù)從葉片中克隆蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因PsSUT1,利用RT-qPCR技術(shù)測(cè)定PsSUT1基因在不同生育時(shí)期的葉片、花瓣等器官中的表達(dá)量,分析該基因在牡丹開(kāi)花過(guò)程中的表達(dá)情況,為牡丹花發(fā)育中蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)的生理及分子機(jī)理研究提供基礎(chǔ)。結(jié)果如下:
1、根據(jù)SUT基因的氨基酸保守區(qū)設(shè)計(jì)兼并引物P1和P2,從牡丹品種“胡紅”(Paeoniasuffruticosa Andr.‘Huhong’)
2、中克隆到1個(gè)SUT基因(PsSUT1)全長(zhǎng),PsSUT1基因cDNA全長(zhǎng)1864 bp,開(kāi)放閱讀框長(zhǎng)1557 bp,編碼519個(gè)氨基酸,屬于GPH蛋白家族,其GeneBank登錄號(hào)為KC542395。
2、PsSUT1符合SUT1亞族蛋白的特征,具有典型的12個(gè)跨膜結(jié)構(gòu),是膜結(jié)合蛋白。通過(guò)同源性分析,與蒺藜狀苜蓿(Medicago truncatula,AFM28284)、橡膠樹(shù)(Heveabrasiliensis,CAM34
3、330)、歐洲山楊(Populus trichocarpa,ADW94613),葡萄(Vitisvinifera,AAF08331)等有較高的同源性。遺傳進(jìn)化分析顯示它與SUT1亞族中核桃的蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的遺傳關(guān)系較近,因此將PsSUT1歸類為SUT1亞族。
3、牡丹PsSUT1基岡在四個(gè)生育時(shí)期的表達(dá)量分析表明,PsSUT1基因在根、莖、葉片和花瓣中均有表達(dá),尤其在一些累積糖分的部位如莖、根中表達(dá)量較高,而花瓣中較低,盛花期莖
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