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文檔簡介
1、目的:
肝細(xì)胞腺瘤(HCA)和局灶性結(jié)節(jié)性增生(FNH)是發(fā)生于結(jié)構(gòu)正?;蚧菊8闻K的良性病變。已經(jīng)知道前者是一種腫瘤性病變,具有特征性的分子病理學(xué)改變,而后者的性質(zhì)及發(fā)病機(jī)制尚未被闡明。本研究選取多個(gè)與HCC發(fā)生有關(guān)聯(lián)的微衛(wèi)星標(biāo)志,以期能夠揭示FNH和HCA中的染色體等位基因雜合性丟失(LOH)在肝腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用。
方法:
選取5例經(jīng)典型FNH,9例HCA和18例分化好的(Edmon
2、dsonⅠ或Ⅱ級)肝細(xì)胞肝癌(HCC),通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增57個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn),應(yīng)用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示LOH。通過免疫組織化學(xué)方法對9例肝腺瘤檢測β-catenin蛋白表達(dá)。
結(jié)果:
18例HCC均為乙型肝炎病毒感染,其中一例同時(shí)合并丙型肝炎病毒感染。所有HCC標(biāo)本中均可檢測LOH,單一病例發(fā)生LOH的微衛(wèi)星均數(shù)為4個(gè)(0-12)。57個(gè)檢測的位點(diǎn)中,33個(gè)(58%)被累及,6個(gè)在這些HCC
3、標(biāo)本中呈現(xiàn)高頻(≥30%)LOH,位于6q、8p、11p、16q和17p。
9例HCA中,2例伴有不典型增生(即小細(xì)胞性改變,SCC),β-catenin免疫組織化學(xué)檢測均顯示胞膜陽性,未見明確胞漿和胞核陽性。9例HCA均顯示有等位基因失衡,累及16個(gè)(28%)位點(diǎn),其中8個(gè)為高頻位點(diǎn),位于11p、13q和17p。單個(gè)HCA病變發(fā)生LOH位點(diǎn)均數(shù)為3個(gè)(1.5)。
5例FNH中均未檢測到SCC改變,LOH檢測
4、均為陰性。然而,這些FNH標(biāo)本中都可以見到多個(gè)透明細(xì)胞為主型的變異肝細(xì)胞病灶(FAH)和結(jié)節(jié)(NAH),后一種病變構(gòu)成FNH中多數(shù)體積較大(直徑>1 mm)的小結(jié)節(jié)。選取NAH較多且明顯的1例FNH病變,應(yīng)用顯微切割分離了25個(gè)NAH,其中13個(gè)病變多數(shù)微衛(wèi)星位點(diǎn)擴(kuò)增成功。這些NAH病變均顯示出LOH,共累及21個(gè)(37%)位點(diǎn),其中6個(gè)為高頻位點(diǎn),位于8p、11p、13q和17p。單個(gè)病變發(fā)生LOH的位點(diǎn)均數(shù)為4個(gè)(1-6)。不同NA
5、H病變之間LOH組型也不相同,顯示是互相獨(dú)立的病變個(gè)體。
NAH、HCA和HCC的LOH位點(diǎn)分布不同,頻率最高的位點(diǎn)分別是D8S298(70%)、D11S1301(75%)和D6S1008(50%)。這三種病變中,NAH中發(fā)生LOH的位點(diǎn)累及染色體區(qū)域與HCA基本相似。然而,前者中8p發(fā)生LOH的頻度高于后者;NAH與HCA在16q改變中也不相同,前者累及7個(gè)位點(diǎn)中的5個(gè),后者僅累及1個(gè)。
結(jié)論:
6、 分化較好的HCC中存在廣泛的等位基因失平衡,高頻率LOH位點(diǎn)定位于染色體6q、8p、11p、16q和17p:HCA中也存在LOH,但分布較為局限,高頻位點(diǎn)位于11p、13q和17p。FNH中未檢測到LOH,與其多克隆特征一致,但組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)廣泛存在FAH和NAH。對顯微切割的不同NAH微衛(wèi)星位點(diǎn)檢測顯示,所有小結(jié)節(jié)均存在LOH,提示他們都已經(jīng)屬于腫瘤性病變;NAH中LOH高頻位點(diǎn)位于8p、11p、13q和17p,與HCA相似。來自
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