米非司酮對(duì)早早孕及早孕蛻膜和絨毛組織中VEGF、VEGFR-2(KDR)表達(dá)的影響.pdf

1、目的：米非司酮作為強(qiáng)有力的孕激素受體拮抗劑，已被廣泛應(yīng)用于臨床終止早期妊娠。迄今為止，其作用機(jī)制已經(jīng)發(fā)展到基因水平，然而各種作用機(jī)制尚未完全明確。在妊娠階段，胎盤微血管的生成及其血管網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建對(duì)于胎兒的發(fā)育有至關(guān)重要的作用。目前，米非司酮廣泛用于臨床終止40～49天的早孕，對(duì)米非司酮抗早孕機(jī)制的研究及報(bào)道中，其研究對(duì)象大都是對(duì)早孕40～49天的人群，關(guān)于米非司酮對(duì)早早孕≤39天的作用機(jī)制與早孕40～49天的作用機(jī)制是否相同有待于進(jìn)一步研

2、究。
　　 本研究通過免疫組化及熒光定量PCR兩種試驗(yàn)方法觀察米非司酮對(duì)早早孕及早孕期絨毛和蛻膜中VEGF及其受體KDR的影響來探討米非司酮抗早早孕及早孕作用機(jī)制的異同點(diǎn)，進(jìn)而為拓寬米非司酮臨床抗早孕時(shí)間的選擇提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.本研究所用標(biāo)本取自2008年10月至2009年4月在河北省人民醫(yī)院婦產(chǎn)科門診自愿要求終止早早孕及早孕的婦女各20例：對(duì)照組20例，為停經(jīng)40～49天的早孕婦女；研究組

3、20例，為停經(jīng)≤39天的早早孕婦女。兩組均頓服米非司酮150mg，48小時(shí)后陰道后穹窿放置米索前列醇400μg，2小時(shí)后行負(fù)壓吸引術(shù)，分別留取兩組的蛻膜、絨毛組織。
　　 2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法和熒光定量PCR檢測(cè)兩組蛻膜、絨毛組織中VEGR及KDR的表達(dá)。
　　 3.運(yùn)用SAS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.HE染色光鏡觀察絨毛、蛻膜結(jié)果對(duì)照組蛻膜組織包括兩種細(xì)胞：蛻膜細(xì)胞和顆粒細(xì)

4、胞，其結(jié)構(gòu)較完整，排列緊密，可見蛻膜細(xì)胞呈灶狀變性、壞死，間質(zhì)水腫，毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞間有出血。實(shí)驗(yàn)組的變化基本同于對(duì)照組。
　　 對(duì)照組絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，外層為合體滋養(yǎng)細(xì)胞，內(nèi)層為細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞，細(xì)胞界限清楚，可見絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞變性、壞死，甚至脫落，炎細(xì)胞浸潤(rùn)，絨毛間質(zhì)水腫，血液淤積和纖維素沉積，實(shí)驗(yàn)組的變化基本同于對(duì)照組。
　　 2.VEGF在蛻膜、絨毛組織中的表達(dá)（免疫組化）
　　

5、對(duì)照組蛻膜組織中VEGF陽性表達(dá)主要位于大部分蛻膜細(xì)胞，陽性顆粒多位于胞核內(nèi)，胞漿也有少量表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組VEGF表達(dá)與對(duì)照組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 對(duì)照組絨毛組織中VEGF在絨毛細(xì)胞胞核和胞漿內(nèi)均有陽性表達(dá)，實(shí)驗(yàn)組VEGF表達(dá)與對(duì)照組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.KDR在蛻膜、絨毛組織中的表達(dá)（免疫組化）
　　 對(duì)照組蛻膜組織中KDR陽性表達(dá)位于大部分蛻膜細(xì)胞及少數(shù)腺上皮細(xì)胞的

6、胞核和胞漿內(nèi)，實(shí)驗(yàn)組KDR表達(dá)與對(duì)照組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 對(duì)照組絨毛組織中KDR呈陽性表達(dá)，主要位于絨毛細(xì)胞胞核和胞漿內(nèi)，實(shí)驗(yàn)組KDR表達(dá)與對(duì)照組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 4.VEGF在蛻膜、絨毛組織中經(jīng)熒光定量PCR的檢驗(yàn)結(jié)果經(jīng)熒光定量PCR測(cè)定，并經(jīng)兩樣本t檢驗(yàn)分析證實(shí)：蛻膜VEGF在早早孕組的表達(dá)（0.8901±0.1817）與在早孕組的表達(dá)（0.9699±0.3134）相

7、比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 經(jīng)熒光定量PCR測(cè)定，并經(jīng)兩樣本t檢驗(yàn)分析證實(shí)：絨毛VEGF在早早孕組的表達(dá)（1.0035±0.1907）與在早孕組的表達(dá)（1.2105±0.3386）相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 5.KDR在蛻膜、絨毛組織中經(jīng)熒光定量PCR的檢驗(yàn)結(jié)果經(jīng)熒光定量PCR測(cè)定，并經(jīng)兩樣本t檢驗(yàn)分析證實(shí)：蛻膜KDR在早早孕組的表達(dá)（0.4425±0.1989）與在早孕組的表達(dá)（0.527

8、3±0.1155）相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 經(jīng)熒光定量PCR測(cè)定，并經(jīng)兩樣本t檢驗(yàn)分析證實(shí)：絨毛KDR在早早孕組的表達(dá)（0.5414±0.1499）與在早孕組的表達(dá)（0.6232±0.2179）相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.VEGF，KDR在早早孕（停經(jīng)≤39天）及早孕（停經(jīng)40～49天）的子宮蛻膜、絨毛組織中均有表達(dá)：VEGF主要表達(dá)于大部分蛻膜細(xì)胞胞核內(nèi)，胞漿

9、也有少量表達(dá)，絨毛細(xì)胞胞核和胞漿內(nèi)均有表達(dá)；KDR主要表達(dá)于大部分蛻膜細(xì)胞及少數(shù)腺上皮細(xì)胞的胞核和胞漿內(nèi)，絨毛細(xì)胞胞核和胞漿內(nèi)。
　　 2.米非司酮能抑制蛻膜、絨毛組織中VEGF，KDR的表達(dá)，破壞VEGF，KDR在其孕早期的正常作用，使妊娠難以維持，繼發(fā)流產(chǎn)，但是米非司酮對(duì)早早孕≤39天及早孕40～49天子宮蛻膜、絨毛組織中VEGF、KDR的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，理論上可以認(rèn)為米非司酮對(duì)早早孕≤39天及早孕40～49天的藥流效果是