合體滋養(yǎng)層細(xì)胞微粒與子癇前期發(fā)病的關(guān)系探討.pdf

1、目的：比較輕度子癇前期與重度子癇前期外周血合體滋養(yǎng)層細(xì)胞微粒(syncytiotrophoblast microparticles STBM)的表達(dá)水平，比較早發(fā)型重度子癇前期與晚發(fā)型重度子癇前期血漿STBM的水平，以及硫酸鎂的應(yīng)用、分娩對(duì)重度子癇前期血漿STBM表達(dá)的影響；并分析STBM是否能夠影響中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b的表達(dá)情況，探討STBM與子癇前期疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系，以及STBM對(duì)中性粒細(xì)胞的影響，為深入了解子癇前期的發(fā)病

2、機(jī)制提供依據(jù)。
　　 方法：①選擇2010年3月至2010年8月在上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院住院的輕度子癇前期10例，重度子癇前期20例（早發(fā)型和晚發(fā)型各10例），正常妊娠婦女10例為研究對(duì)象。并將重度子癇前期分為入院未應(yīng)用硫酸鎂治療前、硫酸鎂應(yīng)用3天后、分娩后24小時(shí)，對(duì)此三個(gè)時(shí)段的血漿STBM水平作對(duì)比分析，采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)測(cè)定母體血漿中STBM濃度。②收集2例正常健康剖宮產(chǎn)孕婦胎盤,采用改良Smith法無(wú)

3、菌制備STBM，BCA法蛋白定量確定其濃度，ELISA法分析STBM的胎盤堿性磷酸酶濃縮度，以確定其純度。③將不同濃度STBM（75ug/ml、150ug/ml、300ug/ml）與中性粒細(xì)胞共孵育，以佛波酯（PMA）作為陽(yáng)性對(duì)照，以制備的紅細(xì)胞膜作為陰性對(duì)照，流式細(xì)胞儀檢測(cè)中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：①重度子癇前期組孕婦血漿STBM濃度（79.27±22.26 ng/ml）明顯高于輕度組（45.74±

4、20.66 ng/ml）和正常對(duì)照組（36.09±16.73 ng/ml）(P<0.05)。輕度組與正常對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。②早發(fā)型重度子癇前期組孕婦血漿STBM濃度（96.15±14.70ng/ml）高于晚發(fā)型組（62.39±14.22 ng/ml）(P<0.05)。③重度子癇前期硫酸鎂應(yīng)用前（79.27±22.26 ng/ml）后（75.19±26.29 ng/ml），STBM水平無(wú)明顯變化(P>0.05)，

5、分娩后（25.50±9.97 ng/ml）與分娩前（79.27±22.26 ng/ml）相比，STBM水平顯著下降(P<0.05)。④重度子癇前期患者血漿STBM濃度與血清白蛋白、新生兒出生體重呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、24小時(shí)尿蛋白定量呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，與平均動(dòng)脈壓、血白細(xì)胞、血中性粒細(xì)胞、肌酐、尿酸、凝血酶原、部分凝血活酶時(shí)間、纖維蛋白原、D-二聚體、纖維蛋白原降解產(chǎn)物均無(wú)明顯相

6、關(guān)性(P>0.05)。⑤利用PALP檢測(cè)STBM的純度，制備的STBM的PALP蛋白表達(dá)水平是相應(yīng)胎盤組織的16.07倍。⑤BCA法對(duì)STBM進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定，制備的STBM懸浮液蛋白濃度為3mg/ml。⑥經(jīng)STBM處理后，中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b的表達(dá)明顯增強(qiáng)。STBM濃度為75ug/ml、150ug/ml、300ug/ml時(shí)，中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b表達(dá)的平均對(duì)數(shù)熒光強(qiáng)度分別為37.57±2.86、97.89±9.41、20

7、3.2±88.29。隨著STBM劑量的增加，中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b的表達(dá)明顯增強(qiáng)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。紅細(xì)胞膜劑量為75ug/ml、150ug/ml、300ug/ml時(shí)，中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b表達(dá)的平均對(duì)數(shù)熒光強(qiáng)度分別為28.36±0.56、32.81±1.19、33.71±3.89。不同濃度紅細(xì)胞膜對(duì)中性粒細(xì)胞粘附分子CD11b表達(dá)的影響相似，組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。相同劑量下，紅細(xì)胞膜對(duì)中性粒

8、細(xì)胞粘附分子CD11b的影響明顯低于STBM處理組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：①STBM存在于正常孕婦及子癇前期患者血漿中，在后者的表達(dá)水平更高。較輕度子癇前期而言，重度子癇前期血漿中有更多的STBM脫落，較晚發(fā)型重度子癇前期而言，早發(fā)型重度子癇前期血漿中有更多的STBM脫落，母體血漿STBM水平與子癇前期疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)；②硫酸鎂的應(yīng)用并不能改善重度子癇前期患者胎盤組織的血液灌注量來(lái)減少STBM的釋放，