脂多糖調(diào)節(jié)細(xì)胞因子在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)及其與子癇前期的關(guān)系.pdf

1、本文研究目的：通過檢測(cè)脂多糖對(duì)體外無血清條件下培養(yǎng)的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用，探討這些細(xì)胞因子與子癇前期的關(guān)系；觀察脂多糖對(duì)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用，以及腫瘤壞死因子在此過程中的作用。同時(shí)，觀察腫瘤壞死因子-α和凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3在子癇前期患者胎盤的表達(dá)。在這些基礎(chǔ)上，揭示細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的天然免疫細(xì)胞特性，闡明脂多糖調(diào)節(jié)細(xì)胞因子在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)及其與子癇前期的關(guān)系。 研究方法： 采集早孕絨毛、分離細(xì)

2、胞滋養(yǎng)細(xì)胞，采用無血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。采用人細(xì)胞因子抗體芯片觀察脂多糖對(duì)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用；采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、免疫熒光、激光共聚焦、Hoechst DNA染色、透射電鏡、流式細(xì)胞儀、Western blot等技術(shù)觀察脂多糖對(duì)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)作用，以及腫瘤壞死因子-α在此過程中的作用。采用免疫組織化學(xué)方法觀察子癇前期胎盤組織腫瘤壞死因子-α和半胱氨酸蛋白酶．3的表達(dá)。 研究結(jié)果： 細(xì)胞因子抗體芯片

3、結(jié)果表明，脂多糖對(duì)細(xì)胞因子在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用。脂多糖促進(jìn)CXC類趨化因子生長(zhǎng)基因相關(guān)產(chǎn)物和生長(zhǎng)基因相關(guān)-α的表達(dá)，抑制CC類趨化因子單核細(xì)胞趨化蛋白-2、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1δ和RANTES的表達(dá)；脂多糖促進(jìn)前炎性細(xì)胞因子白介素-1β、白介素-6、白介素-12p40p70、干擾素-γ、腫瘤壞死-α和抑瘤素M的表達(dá)，抑制抑炎性細(xì)胞因子白介素-4和白介素-13的表達(dá)，但是促進(jìn)抑炎性細(xì)胞因子白介素-10的表達(dá)；脂多糖促進(jìn)生長(zhǎng)因子白

4、介素-2、白介素-7、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和血小板衍生生長(zhǎng)因子的表達(dá)，抑制表皮生長(zhǎng)因子、白介素-15和血管緊張素原的表達(dá)；脂多糖對(duì)單核細(xì)胞趨化蛋-1、單核細(xì)胞趨化蛋-3、巨噬細(xì)胞衍化趨化因子、腫瘤壞死因子-β、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1、單核細(xì)胞集落刺激因子、白介素-5、上皮細(xì)胞一中性粒細(xì)胞活化肽-78、單核細(xì)胞因子、粒細(xì)胞集落刺激因子、干細(xì)胞因子、瘦素、基質(zhì)細(xì)胞源性細(xì)胞因子-1、1-309、TRAC和TGF-β1的表達(dá)沒有影響。 通

5、過對(duì)形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)等定性、定量分析表明，脂多糖在體外能夠誘導(dǎo)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，并呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系；ELISA和激光共聚焦研究表明，脂多糖促進(jìn)體外培養(yǎng)的細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞分泌腫瘤壞死因子，亦呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系；相關(guān)分析表明，腫瘤壞死因子的表達(dá)與細(xì)胞凋亡指數(shù)正相關(guān)。 對(duì)子癇前期患者的研究表明，胎盤組織腫瘤壞死因子和caspase-3的表達(dá)明顯高于正常孕婦。 研究結(jié)論： 因?yàn)榧?xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞具有天然免疫細(xì)胞特性，所以脂多糖能夠調(diào)節(jié)

6、一些與子癇前期的發(fā)生有密切關(guān)系的細(xì)胞因子在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)；脂多糖促進(jìn)CXC類趨化因子的表達(dá)，活化中性粒細(xì)胞；促進(jìn)前炎性細(xì)胞因子，抑制抗炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，誘發(fā)和加劇母胎界面和母體全身炎癥；調(diào)節(jié)多種生長(zhǎng)因子的表達(dá)，抑制細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)，引起Th1/Th2比例失衡。本文首次發(fā)現(xiàn)脂多糖能夠調(diào)節(jié)Oncostatin M、IL-7、IL-13、GRO、和GRO-α在細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)。腫瘤壞死因子-α促進(jìn)細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡，在子癇前期的發(fā)病機(jī)