子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞差異表達(dá)蛋白的初步研究.pdf

1、子癇前期是妊娠期特有的疾病，發(fā)病率5﹪～8﹪，是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡率增高的主要原因之一。本病的特點(diǎn)是妊娠20周后出現(xiàn)高血壓、蛋白尿、水腫等臨床表現(xiàn)，導(dǎo)致全身性、多系統(tǒng)功能紊亂，嚴(yán)重影響母嬰的健康。子癇前期的確切病因及發(fā)病機(jī)制尚未闡明，使該病在診療、預(yù)防上產(chǎn)生了一定困難。以往的研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期發(fā)生與滋養(yǎng)層細(xì)胞功能異常有關(guān)，滋養(yǎng)層細(xì)胞功能異常包括侵襲能力低下、粘附因子和細(xì)胞因子表達(dá)異常、免疫功能紊亂、細(xì)胞過度凋亡、血管活性物質(zhì)分泌失常

2、等。 目的分析、鑒定子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞差異表達(dá)蛋白，探討差異蛋白與疾病發(fā)生的可能關(guān)系，為深入理解引發(fā)子癇前期的復(fù)雜分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 方法分離、純化、鑒定5例正常妊娠婦女和5例子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞，超聲后提取細(xì)胞總蛋白。雙向電泳技術(shù)對(duì)總蛋白進(jìn)行分離，銀染顯色，獲得蛋白質(zhì)圖譜。用PDQuest軟件進(jìn)行圖像分析，尋找差異蛋白。再利用質(zhì)譜技術(shù)對(duì)差異蛋白進(jìn)行分析，得到蛋白的肽質(zhì)量指紋譜，上網(wǎng)比對(duì)檢索，得到蛋白的名稱

3、。 結(jié)果正常妊娠及子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞總蛋白雙向電泳各重復(fù)3次，得到重復(fù)性好的蛋白圖譜。PDQuest軟件進(jìn)行圖像分析發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞有34個(gè)蛋白點(diǎn)在質(zhì)或量上存在表達(dá)增高或減少(未給出)，選擇其中9個(gè)點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定，得到蛋白質(zhì)的肽質(zhì)量指紋譜，發(fā)現(xiàn)有三個(gè)蛋白點(diǎn)為同一種蛋白。在鑒定出的7種蛋白質(zhì)中，有4種蛋白：蛋白質(zhì)二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)固有蛋白(ERp44)，二氫硫辛酸脫氫酶，TIM-21樣蛋白