騷擾阿蚊唾液腺蛋白對免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景和目的:
  蚊蟲(Culicidae)是蟲媒?。ˋrbo-disease)的重要媒介,全球已知蚊種有3500余種,蚊蟲傳播疾病具有蚊種特異性,不同的蚊種傳播的疾病不同,同一蚊種也可以傳播多種疾病,同種疾病也可由幾種蚊種為傳播媒介,如:按蚊可以傳播人類瘧疾(如岡比亞按蚊Anopheles gambiae),埃及伊蚊(Aedes aegypti)和白紋伊蚊(Aedes albopictus)傳播黃熱病和登革熱等。
  騷擾

2、阿蚊(Armigeres subalbatus)是與人類居住環(huán)境關(guān)系密切的蚊蟲,目前已知,它可以傳播淋巴絲蟲病,犬惡絲蟲病,日本腦炎,西尼羅熱等疾病。廣東省地處亞熱帶,一直是蚊媒病的重要流行區(qū),溫暖、潮濕的氣候為蚊子的生存提供了良好的環(huán)境,蚊蟲越冬時間短,甚至無需越冬,蚊媒性疾病流行和威脅依然不能忽視。
  吸血昆蟲的唾液腺蛋白在傳播蟲媒病的過程中發(fā)揮重要作用,是目前醫(yī)學(xué)研究中的一項重要課題。本研究從免疫細(xì)胞的角度,觀察唾液腺蛋白

3、對宿主免疫系統(tǒng)的影響,分別從唾液腺蛋白對宿主免疫細(xì)胞的負(fù)向調(diào)節(jié)作用,唾液腺蛋白對宿主免疫細(xì)胞凋亡的影響,探究騷擾阿蚊傳播疾病的機(jī)制。
  方法:
  1.野外采集騷擾阿蚊的四齡幼蟲和蛹,在實驗室飼養(yǎng)至成蚊。
  2.分別用不同濃度的騷擾阿蚊雌、雄成蚊唾液腺蛋白連同干擾素刺激小鼠腹腔液細(xì)胞,用RT-PCR檢測細(xì)胞因子CXCL10,STAT1,iNOS, IFN-β, TNF-α的表達(dá)情況,用Griess Test檢測一氧

4、化氮(NO)的產(chǎn)生情況。
  3.用雌性騷擾阿蚊唾液腺蛋白刺激小鼠的腹腔液細(xì)胞、脾淋巴細(xì)胞,人的外周血單核細(xì)胞(PBMC),RAW264.7,THP-1,用 Annexin-V檢測騷擾阿蚊唾液腺蛋白對免疫細(xì)胞凋亡情況的影響,
  4.分別用熒光顯微鏡檢測caspase-3的表達(dá)情況,用流式細(xì)胞儀檢測Fas,caspase-8, p38 MAPK,JNK在唾液腺蛋白誘導(dǎo)的免疫細(xì)胞凋亡中的作用。
  結(jié)果:
  1:

5、經(jīng)雌性騷擾阿蚊唾液腺蛋白預(yù)處理的小鼠腹腔液細(xì)胞中CXCL10,STAT1,iNOS, IFN-β,TNF-α的表達(dá)較單獨(dú)IFN-γ處理組顯著下降;雄性唾液腺蛋白預(yù)處理的與陰性對照組沒有區(qū)別。
  2:雌性騷擾阿蚊唾液腺蛋白可以誘導(dǎo)小鼠腹腔液細(xì)胞,小鼠的脾淋巴細(xì)胞,人的外周血單核細(xì)胞(PBMC),細(xì)胞株RAW264.7,THP-1發(fā)生凋亡;雄性騷擾阿蚊唾液腺蛋白未誘導(dǎo)宿主免疫細(xì)胞發(fā)生凋亡。
  3:雌性騷擾阿蚊唾液腺蛋白誘導(dǎo)F

6、as受體表達(dá)上調(diào),但未激活caspase-8,p38抑制劑可以抑制騷擾阿蚊唾液腺蛋白誘導(dǎo)的小鼠腹腔液細(xì)胞凋亡。
  結(jié)論:
  1:雌性騷擾阿蚊唾液腺蛋白誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡,但沒有嚴(yán)格的宿主和免疫細(xì)胞的特異性。
  2:騷擾阿蚊傳播疾病的機(jī)制,在一定程度上依賴于雌蚊唾液腺蛋白誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡,干擾宿主的免疫反應(yīng)。
  3:Fas受體,caspase-3, caspase-8,p38 MAPK參與雌性騷擾阿蚊唾液腺蛋

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