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1、目的:探討依達拉奉(Eda)預(yù)處理對谷氨酸(Glu)損傷后新生大鼠大腦皮層腦片的神經(jīng)保護機制。方法:采用新生大鼠大腦皮層腦片的Glu模型,大腦皮層腦片離體培養(yǎng)第三天后被隨機分成三組:Eda預(yù)處理組、Glu組、對照組,每組12例。Eda預(yù)處理組腦片給予含有100μmol/L Eda的培養(yǎng)基孵育24h,換成含1mmol/L Glu的培養(yǎng)基作用30min;Glu組腦片直接給予含1mmol/L Glu的培養(yǎng)基作用30min;對照組用正常培養(yǎng)基培
2、養(yǎng)。Glu作用后1h檢測乳酸脫氫酶(LDH)釋放率反應(yīng)腦片損傷情況,用2,3,5—三苯基四氮唑(TTC)染色法定量反應(yīng)腦片活性(A490值),Glu作用后換成正常培養(yǎng)基,繼續(xù)孵育72h后行甲苯胺藍染色觀察神經(jīng)元數(shù)量,免疫組織化學(xué)方法觀察膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)和半胱天冬酶3(caspase-3)蛋白陽性表達的細胞。結(jié)果:1.與對照組相比,Glu組皮層腦片LDH釋放率增加(P<0.01),TTC染色 A490值降低(P<0.01),神
3、經(jīng)元數(shù)量減少,GFAP陽性細胞數(shù)量增多(P<0.01),caspase-3陽性細胞增加了194.85%;2.與Glu組比較時,Eda預(yù)處理組皮層腦片LDH釋放率降低(P<0.01),TTC染色A490值增加(P<0.01),神經(jīng)元數(shù)量增多,GFAP陽性細胞數(shù)量減少(P<0.01),caspase-3陽性細胞數(shù)量減少了144.20%。結(jié)論:Eda預(yù)處理可減輕Glu損傷后的新生大鼠皮層神經(jīng)元細胞損傷,可能的神經(jīng)保護機制與抑制星形膠質(zhì)細胞(A
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