抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒中藥多糖及多糖復(fù)方的體外篩選.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引發(fā)的以被感染豬只發(fā)熱、厭食，受孕母豬后期流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)弱胎、死胎及木乃伊胎，各年齡段的豬（尤其是幼齡豬），呼吸困難為特點的高度傳染性疾病。國際獸醫(yī)局于1992年將其命名為豬

2、繁殖與呼吸綜合征（PRRS），目前，該病已遍及北美洲和歐洲，在全球范圍內(nèi)傳播，且無有效臨床治療用藥物。
　　目前，病毒性疾病已成為威脅人類和動物健康最大原因之一，其防治主要是依靠疫苗和抗病毒藥物。近些年來，中藥制劑的抗病毒作用已越來越受到人們的重視。中藥的應(yīng)用，最重要的形式和精髓在于配伍形成復(fù)方。本試驗根據(jù)中藥配伍原則，將6種在體外對PRRSV表現(xiàn)出良好抑制作用的中藥多糖組成8個中藥多糖成分復(fù)方，采用MTT法觀察其體外抗PRRSV

3、效果，以期初步篩選抗PRRS的中藥多糖成分復(fù)方，為進一步研究PRRS臨床治療用藥提供試驗參考。
　　本試驗選取了淫羊藿、板藍(lán)根、黃精、枸杞、黨參、當(dāng)歸、大蒜、黃芪8種常見中藥材，用傳統(tǒng)的水煎醇沉的方法從中提取植物多糖，并用苯酚硫酸法測其多糖含量。結(jié)果顯示，淫羊藿、板藍(lán)根、黃精、枸杞、黨參、當(dāng)歸、大蒜、黃芪的多糖提取率(g.kg-1)分別為55.2、61.9、35.6、48.5、53.6、49.3、62.7、39.1。糖含量分別為1

4、6.8％、74.0％、46.1％、36.5％、47.9％、22.4％、93.4％、66.0％。
　　為了評價8種多糖的抗病毒作用，將淫羊藿多糖、板藍(lán)根多糖、黃精多糖、枸杞多糖、黨參多糖、當(dāng)歸多糖、大蒜多糖及黃芪多糖與PRRSV以先加多糖、先接種病毒、病毒和多糖感作后同時加入3種方式加入培養(yǎng)的Marc-145細(xì)胞單層上，觀察細(xì)胞病變程度，并用MTT法測定細(xì)胞A570值的變化，以評價其抗PRRSV感染細(xì)胞能力。結(jié)果顯示淫羊藿多糖、板藍(lán)

5、根多糖、黃精多糖、枸杞多糖、黨參多糖、黃芪多糖抗PRRSV效果較好，當(dāng)歸多糖和大蒜多糖效果不顯著。
　　考慮到單味藥多糖的效果畢竟有限，而且中藥主要以方劑的形式用藥，本研究選取了6種抗PRRSV效果較好的中藥多糖，根據(jù)中藥配伍的原則，組成8個多糖復(fù)方，按照先加多糖、先接種病毒、病毒和多糖感作后同時加入3種方式加入培養(yǎng)的Marc-145細(xì)胞單層上，觀察細(xì)胞病變程度，并用MTT法測定細(xì)胞A570值的變化，篩選效果較好的多糖復(fù)方。結(jié)果顯