2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的: 研究新型組蛋白去乙酰化酶抑制劑異硫氰酸苯己酯(PHI)對(duì)急性T淋巴細(xì)胞性白血病Molt-4細(xì)胞p15基因的去甲基化作用及誘導(dǎo)沉默基因從新(de novo)表達(dá)作用,并進(jìn)一步探討其去甲基化作用的機(jī)制,為PHI作為一種新型抗腫瘤藥物提供理論依據(jù)。 方法: 采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(MSP)法檢測(cè)PHI作用前后Molt-4細(xì)胞株甲基化狀態(tài)的變化情況,并對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行基因測(cè)序鑒定,以經(jīng)典的DNA甲基化抑制劑

2、5-雜氮胞苷(5-Aza)和經(jīng)典的組蛋白去乙?;敢种苿┕徘志?TSA)為對(duì)照;半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)Molt-4細(xì)胞經(jīng)過(guò)不同濃度PHI處理后DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)、3A(DNMT3A)、3B(DNMT3B)、p15基因的mRNA的表達(dá)變化;用蛋白免疫印跡法(Westem Blotting)檢測(cè)Molt-4細(xì)胞經(jīng)過(guò)不同濃度PHI處理后的P15蛋白的表達(dá)變化等。 結(jié)果: (1)甲基化特

3、異性聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)提示Molt-4細(xì)胞p15基因發(fā)生高甲基化而失活。不同濃度PHI作用于Molt-4細(xì)胞5天后,PHI各組p15基因的甲基化程度減弱,p15基因的異常甲基化現(xiàn)象被逆轉(zhuǎn),沉默的p15基因從新表達(dá),并呈明顯的濃度依賴(lài)性。 (2)不同濃度PHI處理5天后,與空白對(duì)照組相比,各組的DNMT1和DNMT3B的tuRNA表達(dá)下降(p<0.05);DNMT3A的mRNA表達(dá)則無(wú)明顯變化(p>0.05)。 (3)PHI

4、處理Molt-4細(xì)胞5天后,與空白對(duì)照組相比,各組的P15蛋白表達(dá)增加,且隨著藥物濃度的增加,其表達(dá)增強(qiáng)。 結(jié)論: (1)新型組蛋白去乙?;敢种苿㏄HI有DNA去甲基化的作用,能誘導(dǎo)沉默的p15基因從新表達(dá)。 (2)PHI可能是通過(guò)降低DNA甲基轉(zhuǎn)移酶DNMT1和DNMT3B的活性從而誘導(dǎo)p15基因產(chǎn)生去甲基化,或者(和)是通過(guò)改變p15基因附近組蛋白的乙?;?,導(dǎo)致染色體空間結(jié)構(gòu)的變化,誘導(dǎo)p15基因產(chǎn)生去

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