版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領
文檔簡介
1、背景: 牙周炎是牙周組織炎癥性疾病;菌斑細菌及其產(chǎn)物是牙周炎最主要的病因,是引發(fā)牙周炎必不可少的始動因子。成纖維細胞是牙周組織中最多、功能上最重要的細胞,任何原因所造成的成纖維細胞的破壞,均能影響牙支持組織的健康。故一種理想的牙周炎治療藥物,既要達到良好的抑菌效果,又要保護牙周組織,具有較小的毒性作用。 目前第3代硝基咪唑類衍生物奧硝唑因其具有較強的抗厭氧菌活性,成為治療牙周炎的主要抗菌藥物,而抗生素的長期用藥具有逐漸產(chǎn)
2、生耐藥性的潛在隱患。牙周炎作為一種多細菌混合感染、局部全身因素共同影響的疾病,一種抗厭氧菌的單一藥物無法達到良好的治療效果,現(xiàn)在普遍推崇聯(lián)合用藥方案。尋求一種可行且有效的聯(lián)合用藥方案成為牙周炎治療領域的研究熱點。 近年來,蜂膠因其具有廣泛的生物學活性和藥理作用得到人們的關(guān)注。以往研究已證實蜂膠和部分抗生素具有抑菌協(xié)同作用,然而主要集中在蜂膠與大環(huán)內(nèi)酯類藥物、多肽類抗生素、氨基苷類抗生素、四環(huán)素和氯霉素類抗生素的聯(lián)合用藥研究,且對
3、需氧菌,如金黃色葡萄球菌的抑菌活性研究較多。在牙周炎治療領域,將蜂膠與牙周抗菌藥物聯(lián)合應用,研究其對牙周厭氧菌的抗菌活性,目前未見報道。考慮蜂膠廣泛的藥物學作用及協(xié)同抑菌的特點,將蜂膠與抗生素聯(lián)合應用治療牙周炎,有望成為一種新型配伍方案。 目的: 本研究在參考國內(nèi)外研究的基礎上,將國產(chǎn)水溶性蜂膠和奧硝唑聯(lián)合,研究其對牙齦卟啉單胞菌(Pg)的體外生長抑制作用及對人牙齦成纖維細胞(HGF)的毒性作用,初步探索蜂膠與奧硝唑聯(lián)合
4、治療牙周炎的可行性,為其更加深入地研究提供初步依據(jù)。 材料與方法: 1.蜂膠抑制Pg體外生長的實驗研究。用心腦浸液(BHI)+Hemin培養(yǎng)基按2倍稀釋法將蜂膠和奧硝唑分別稀釋成8個濃度和14個濃度的藥液。每個試管加入0.5ml標化的菌液(106~107CFU/mL),充分混勻后,厭氧培養(yǎng)48 h。觀察試管的混濁情況,選擇適當濃度段劃線接種于BHⅡ血瓊脂平板上。經(jīng)厭氧培養(yǎng)48 h,無細菌生長的最低藥物濃度為最小殺菌濃度(
5、MBC),設立陰性對照組、陽性對照組。重復實驗3次。 2.蜂膠奧硝唑聯(lián)合抑制Pg體外生長的實驗研究。采用紙片擴散法,將奧硝唑(0.5、0.4、0.3、0.2、0.1 g/L五個濃度)和蜂膠(100、50、25g/L三個濃度)單獨藥敏片及各濃度結(jié)合后的合劑藥敏片貼在接種了Pg的BHI血瓊脂培養(yǎng)基平皿內(nèi)。37℃厭氧培養(yǎng)48 h,測定每一藥敏片的抑菌環(huán)直徑。每種藥敏片重復4次。 3.蜂膠奧硝唑聯(lián)合對HGF的細胞毒性研究。消化第
6、5代細胞,接種于96孔板,設陰性對照組,在37℃,95%濕度和5%CO2的條件下培養(yǎng)24 h,再用含有各濃度蜂膠、蜂膠奧硝唑合劑或奧硝唑的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24 h,用MTT比色法測定吸光度值(A值)。計算出細胞相對增殖率(RGR)。每種試劑選擇RGR約為50%的濃度組進行生長曲線的研究。消化第6代細胞,接種于96孔板,每15孔為一組,一共8組,培養(yǎng)24 h。換上含有試劑的培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)24 h,選擇第1組用MTT比色法測定A值。其余7組
7、棄去含有試劑的培養(yǎng)液,換上新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),連續(xù)7d,每天選擇1組進行A值測定。最后繪制各生長曲線,與陰性對照組曲線比較。 結(jié)果: 1.蜂膠水溶液對Pg具有較好的生長抑制作用,當濃度為1.56g/L時,就無細菌生長,其作用與0.125~0.25mg/L的奧硝唑相當。 2.100 g/L蜂膠的平均抑菌環(huán)大小僅為10.25mm;蜂膠與奧硝唑聯(lián)合后,含100 g/L蜂膠的合劑1組的抑菌環(huán)大小均大于對應濃度的單獨奧硝唑
8、組,含50 g/L蜂膠的合劑2組和含25 g/L蜂膠的合劑3組在奧硝唑低濃度時的抑菌環(huán)大小也大于對應濃度的單獨奧硝唑組。隨著蜂膠濃度的增加,抑菌環(huán)增大。析因分析結(jié)果表明,蜂膠與奧硝唑?qū)g的生長抑制作用存在協(xié)同作用。 3.隨著藥物濃度的降低,HGF的RGR趨于100%,毒性級別趨于O。奧硝唑濃度為0.4g/L或0.8/L時,合劑組的A值均高于對應濃度的奧硝唑組,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05);奧硝唑濃度為0.2g/L或1.2g
9、/L時,三組比較差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 4.1.2g/L奧硝唑組、1.2g/L奧硝唑和1g/L蜂膠合劑組、1.2g/L奧硝唑和0.5g/L蜂膠合劑組及48/L蜂膠組的RGR均約為50%。換上不含藥物的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),連續(xù)7 d測定每組A值,組內(nèi)不同時間點比較,有統(tǒng)計學差別(P<0.05);各時間點內(nèi),實驗組與陰性對照組比較,均有統(tǒng)計學差別(P<0.05),但隨著時間推移,各實驗組的A值均逐漸趨向于陰性對照組。
10、 結(jié)論: 1.蜂膠對Pg具有良好的生長抑制作用,MBC為1.56 g/L。 2.蜂膠奧硝唑聯(lián)合對Pg的生長抑制作用優(yōu)于奧硝唑及蜂膠的單獨用藥,表明蜂膠與奧硝唑?qū)g的生長抑制作用具有協(xié)同作用。 3.1g/L和0.5g/L低濃度蜂膠不會增加奧硝唑?qū)GF的細胞毒性作用,甚至在奧硝唑部分濃度段,表現(xiàn)出降低奧硝唑細胞毒性作用的效果。 4.HGF分別在含有1.2g/L奧硝唑、1.2g/L奧硝唑和1g/L蜂膠合劑、
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 牙齦卟啉單胞菌脂多糖對牙周膜成纖維細胞膠原吞噬作用的影響.pdf
- 骨碎補對人牙齦成纖維細胞增殖分化的實驗研究.pdf
- 黃連素對牙齦卟啉單胞菌的影響.pdf
- 牙齦卟啉單胞菌脂多糖對單核細胞活化的影響.pdf
- AGEs對人牙齦成纖維細胞增殖和Ⅰ型膠原合成的影響.pdf
- 兩種壓電陶瓷對人牙齦成纖維細胞增殖影響的實驗研究.pdf
- 牙齦卟啉單胞菌對人巨噬細胞系U937凋亡的影響.pdf
- 骨碎補對人牙齦成纖維細胞體外誘導作用的實驗研究.pdf
- 牙齦卟啉單胞菌脂多糖對血管內(nèi)皮細胞功能影響的實驗研究.pdf
- 牙齦卟啉單胞菌對牙齦上皮細胞基質(zhì)金屬蛋白酶表達影響的研究.pdf
- 抗牙齦卟啉單胞菌IgY的制備和體外研究.pdf
- 純鈦表面粗糙度對人牙齦成纖維細胞影響的體外實驗研究.pdf
- 純鈦表面不同處理對人牙齦成纖維細胞增殖的影響.pdf
- AOPP對人牙齦成纖維細胞的生物學作用.pdf
- AGEs對人牙齦成纖維細胞凋亡的影響及相關(guān)機制研究.pdf
- 硝苯地平對牙齦成纖維細胞Ⅰ型膠原合成的影響.pdf
- 牙齦卟啉單胞菌誘發(fā)牙周炎病理機制的研究.pdf
- 磁性附著體模擬靜磁場對人牙齦成纖維細胞和人牙周膜成纖維細胞的生物學效應研究.pdf
- 烤瓷合金對人牙齦成纖維細胞生物學行為的影響.pdf
- IL-10對人牙齦成纖維細胞產(chǎn)生IL-1β的影響.pdf
評論
0/150
提交評論