Wnt10b基因失活對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲的影響.pdf

1、目的：應(yīng)用RNA沉默技術(shù)沉默細(xì)胞內(nèi)Wnt10b蛋白的表達(dá)，探討Wnt10b蛋白對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲的作用。
　　方法：根據(jù)Wnt10bmRNA編碼序列設(shè)計(jì)RNA干擾靶點(diǎn)并構(gòu)建特異性小發(fā)夾RNA(shRNA)，通過(guò)慢病毒載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入HepG2細(xì)胞，采用Western blot檢測(cè)Wnt10b蛋白的表達(dá)。采用CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33342熒光染色、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)

2、和Transwell小室，觀察HepG2細(xì)胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲情況。
　　結(jié)果：⑴Wnt10b shRNA對(duì)Wnt10b蛋白表達(dá)水平有顯著的下調(diào)作用(P＜0.05)。⑵體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與control組HepG2細(xì)胞相比，兩組shWnt10b HepG2細(xì)胞的增殖、克隆形成、遷移和侵襲能力均明顯受抑制(P＜0.05)，處于G2期的細(xì)胞數(shù)量明顯增加(P＜0.05)，凋亡率明顯增加(P＜0.05)。
　　結(jié)論：下調(diào)W