藥物及育發(fā)產(chǎn)品中已烯雌酚和雙烯雌酚的衛(wèi)生檢測新方法研究.pdf

1、己烯雌酚和雙烯雌酚是結(jié)構(gòu)相近的人工合成的非甾體雌酚類激素,臨床上用于補充體內(nèi)雌激素不足,治療乳腺癌、前列腺癌、閉經(jīng)和絕經(jīng)期綜合癥等,并能夠促使女性器官及副性征正常發(fā)育,促使子宮內(nèi)膜增生,增強子宮收縮,提高子宮催產(chǎn)素的敏感性;小劑量刺激垂體前葉促性激素及催乳素的分泌,大劑量則起到抑制作用。雙烯雌酚是己烯雌酚的體內(nèi)代謝產(chǎn)物。在畜牧業(yè)中,己烯雌酚和雙烯雌酚主要用于牛奶產(chǎn)量、促進蛋白質(zhì)合成,具有增加蛋白質(zhì)沉積和減少脂肪沉積的作用。長期使用己烯雌

2、酚和雙烯雌酚或食用含有己烯雌酚和雙烯雌酚的奶制品或肉制品會導(dǎo)致婦女更年期紊亂、生育能力下降、女性性早熟、男性女性化,并能導(dǎo)致女性產(chǎn)生乳腺癌、子宮癌等。因此建立方便、快捷的己烯雌酚和雙烯雌酚檢測方法具有重要意義。
　　 在堿性介質(zhì)中,Ag(Ⅲ)配合物氧化魯米諾產(chǎn)生穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號,某些物質(zhì)能顯著增強或抑制魯米諾-Ag(Ⅲ)體系的化學(xué)發(fā)光,并且發(fā)光強度與物質(zhì)濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。本試驗將Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系

3、與流動注射技術(shù)相結(jié)合,建立了檢測己烯雌酚的新方法,并將此方法應(yīng)用于己烯雌酚片劑的含量測定。
　　 毛細(xì)管電泳將電泳技術(shù)與現(xiàn)代微柱分離技術(shù)相結(jié)合,以高壓直流電場為驅(qū)動力,在毛細(xì)管中按各組分的淌度和分配行為的不同進行高效、快速的分離。毛細(xì)管電泳的分離通道為中空的毛細(xì)管,對樣品的預(yù)處理要求較低,本研究旨在建立毛細(xì)管電泳法測定育發(fā)產(chǎn)品中己烯雌酚和雙烯雌酚。
　　 一、流動注射-Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系測定己烯雌酚片劑中己

4、烯雌酚含量
　　 目的:建立流動注射-Ag(Ⅲ)-魯米諾化學(xué)發(fā)光新體系測定己烯雌酚片劑中己烯雌酚含量的新方法。
　　 方法:在堿性條件下,魯米諾被Ag(Ⅲ)氧化產(chǎn)生穩(wěn)定的化學(xué)發(fā)光信號,己烯雌酚能顯著抑制Ag(Ⅲ)-魯米諾體系的化學(xué)發(fā)光作用,且發(fā)光強度與樣品的濃度在一定范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。通過對魯米諾溶液濃度、堿度和Ag(Ⅲ)溶液濃度、堿度等一系列發(fā)光條件進行優(yōu)化選取,在最佳發(fā)光條件下繪制己烯雌酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對樣品進

5、行含量測定。
　　 結(jié)果:流動注射-化學(xué)發(fā)光法測定己烯雌酚的最低檢出限為3.0×10-7mol/L。線性范圍為5.0×10-7-5.0×10mol/L,回歸方程為△I=5.84×108C+548,線性相關(guān)系數(shù)r=0.9989。對1.0×10-5mol/L的己烯雌酚連續(xù)進行平行測定7次,RSD為3.4％,加標(biāo)回收率在88.6％-100.0％之間,RSD為3.7％。
　　 結(jié)論:流動注射化學(xué)發(fā)光法測定己烯雌酚片劑中己烯雌酚含

6、量,方法簡便快捷、準(zhǔn)確可靠,可用于己烯雌酚片劑生產(chǎn)過程己烯雌酚的質(zhì)量控制。
　　 二、毛細(xì)管電泳法測定育發(fā)產(chǎn)品中的己烯雌酚和雙烯雌酚
　　 目的:建立毛細(xì)管電泳-紫外檢測法測定育發(fā)產(chǎn)品己烯雌酚和雙烯雌酚含量的新方法。
　　 方法:采用未涂層彈性熔融石英毛細(xì)管(75μmi.d.×55 cm,有效長度50cm)為分離通道,20mmol/L硼砂(含體積分?jǐn)?shù)為30％的N,N-二甲基甲酰胺)為運行緩沖液,采用重力進樣,進樣

7、時間10s,分離電壓為20kv,紫外檢測波長254nm。
　　 結(jié)果:己烯雌酚和雙烯雌酚在9min內(nèi)達到基線分離,在2.0×10-6-2.0×10-4mol/L,2.0×10-6-2.0×10-4mol/L濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9991、0.9994,檢出限為6.7×10-7mol/L和3.3×10-7mol/L,回收率分別在89.6-94.6％和88.7-104.8％之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.97％和